天津WGBSDNA甲基化售后分析
芯片平台作为目前比较成熟的筛选工具,已经在很多领域有了相应的应用。多家芯片公司在DNA甲基化这块儿有了相应的产品提供,其中应用**为***的就Agilent平台和Illumina平台,相应的产品包括Agilent Human CpG Island Microarray Kit,Infinium HumanMethylation27 BeadChip和Infinium HumanMethylation450K BeadChip。另外Roche NimbleGen和Affymetrix也有相应的芯片推出,但是NimbleGen的芯片今年下半年已经停产不同的芯片平台,各自的实验过程也是不一样的。安捷伦前期采用的甲基化DNA免疫共沉淀(MeDIP)技术。将基因组DNA分成两份,一份用来做 MeDIP,另一份作为对照。两个样品都标记荧光(富集的样品用Cy5标记,对照用Cy3标记),然后与芯片杂交。芯片上每个探针的Cy5/Cy3强度比例显示出该区域的甲基化程度。筛选耐药的相关biomaker及表观调控机制。天津WGBSDNA甲基化售后分析
850K芯片技术优势:MethylationEPICBEadChip兼具***的覆盖范围和高通量功能,因此是EWAS的理想之选。其他优势包括:***的全基因组覆盖范围(>850,000个甲基化位点)CpG岛非CpG和差异甲基化位点FANTOM5增强子ENCODE染色质ENCODE转录因子结合位点miRNA启动子区域实验分析方法重现性98%(针对技术性重复)98%(针对传统HumanMethylation450K芯片对照,MethylationEPIC芯片采用的相同样本)>90%(针对HumanMethylation450K位点内容)用户友好的简化工作流程与FFPE样本兼容MethylationEPICBeadChip遵循用户友好的简化的工作流程,可以从低样本起始量(低至250ng)同时处理多达96个样本该甲基化芯片针对常规样本和FFPE样本提供单CpG位点级别的定量测量,因此能实现超级精细的解析度,方便用户了解表观遗传的变化。重庆MeDIP-SeqDNA甲基化活动甲基化验证方案是TBS。
强化RRBS——高性价比DNA甲基化检测方案。单碱基分辨率,全基因组范围,富集启动子/CpG岛甲基化调控区域,适合人和哺乳动物、动物及鱼类,适合细胞、全血及新鲜冷冻组织,不适合cfDNA及FFPE等片段化样本。项目介绍:简化基因组甲基化测序(ReducedRepresentationBisulfiteSequencing,RRBS)是通过限制性酶切的方法富集基因组DNA上富含CCGG位点的片段,经Bisulfite处理和高通量测序技术进行基因组CpG富集区域内的单碱基分辨率的甲基化测序。相对WGBS而言RRBS技术作为高性价比的甲基化测序方案,测序量大幅减少,在大规模临床样本研究中具有很不错的应用价值。
重亚硫酸盐处理结合测序是目前检测甲基化的金标准。除了全基因组甲基化测序技术等研究手段,对于大样本量甲基化研究来说,更需要灵活、有针对性的技术方案。NGS-BSP方法适合几个到几十个基因或者位点进行大样本甲基化测序或者验证项目,具有更快速的实验周期及低成本优势。单碱基分辨率针对目标序列,非常灵活适合多种样本类型应用方向:450K/850K芯片筛选的差异甲基化CpG位点(DMS)。技术优势:高效灵活的目标区域甲基化检测的工具BSP和高通量测序完美结合,单碱基分辨率适合几个到几十个位点的大样本验证项目适合所有动物样本、周期快、检测位点灵活、性价比高。甲基化验证是甲基化研究必不可少的一环。
芯片种类:Agilent**甲基化芯片,8x60K●和合作伙伴在Agilent公司定制的Promoter芯片。●绝大多数基因是针对基因启动子区域的CpG岛设计探针。●芯片上一共有4160个功能注释比较明确的基因,其中2128个和**发生有关系。●从功能上分,有256基因和细胞凋亡有关,1273个基因和信号传导有关,487个基因和压力和衰老有关。●特别适用于**甲基化研究。案例分析:用Agilent定制甲基化芯片和表达谱芯片共同筛选乳腺*患者的高甲基化基因,并探讨甲基化与基因表达的关系为了寻找乳腺*早期诊断的甲基化标记基因,探讨基因甲基化水平与基因表达量之间的关系,科研者使用甲基化芯片和表达谱芯片进行了相关研究。研究中,甲基化程度检测使用BSP法和COBRA分析,基因表达水平检测用RT-PCR。结果,在乳腺*患者中检测到70对高度甲基化差异***的基因,表达谱芯片分析结果显示在乳腺*患者中这70个基因大部分不表达;RT-PCR结果也显示大部分基因表达量很低甚至不表达。这种研究策略,能够直观方便的筛查患者甲基化基因,有效地寻找乳腺*标记基因,对研究甲基化基因调控基因表达提供研究基础。云生物提供测序服务。北京850K芯片DNA甲基化共同合作
全基因组甲基化分析及特异位点甲基化检测。天津WGBSDNA甲基化售后分析
恶性**细胞从**原发部位,经过淋巴道、血管或体腔等途径,到达身体其他部位继续生长,称为**转移。**转移是*****中的**障碍,也是目前**患者死亡的主要原因。近年来,临床上为了成功进行*****,对**的侵袭和转移进行了大量的研究,发现其中有很多方面和DNA甲基化相关。上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition, EMT)指上皮细胞向间质细胞转化的现象,研究表明EMT在**形成和转移过程中也发挥了非常重要的作用。EMT时上皮组织基本结构消失,如失去细胞间粘附和细胞极性、细胞内骨架重排等,获得间质细胞特性(如细胞迁移能力、侵袭能力、抗凋亡能力等)。EMT**初是在细胞体外培养过程中发现的,随着人们对人体**和实验动物模型的观察越来越深入,发现EMT过程与**发生过程密切相关。尤其是EMT过程对于**浸润(invasion)、转移(metastatic dissemination)以及药物耐受等都有关系,而与EMT过程相对的间质-上皮转化(mesenchymal epithelial transition, MET)过程则似乎是在**细胞播散之后形成转移灶过程中起到重要作用。天津WGBSDNA甲基化售后分析