浙江植物叶绿体基因组小基因组测序服务
采用二代IlluminaHiseq结合三代PacBio测序技术对样本DNA进行基因组测序,分别构建了IlluminaPE文库(300-500bp)和PacBio文库(8~10kb),对获得的测序数据利用生物信息学分析方法完成基因组完成图绘制。信息分析主要分为6大步骤:1.下机数据质控。过滤测序质量值低的reads,过滤duplicationreads,获得高质量的Cleandata;2.基因组组装。利用组装软件对Cleandata进行组装,多次调整参数及补洞后获得基因组完成图序列;3.基因组组分分析。组装完成后,分析样品的基因组组分,包括编码基因、ncRNA等;4.基因功能注释。与通用功能数据库比对获得样本的基因功能注释信息,并对特定功能进行分类;5.比较基因组分析。从基因组、基因两个层面比较样品与参考基因组的差异,包括共线性比较,SNP、Indel、SV检测,Core-Pan分析,物种进化分析等;6.基因组可视化分析。将编码基因、ncRNA、基因组GC%等信息以圈图的形式展示。 小基因组测序实验步骤是什么?浙江植物叶绿体基因组小基因组测序服务
细胞器基因组的拷贝数:在**细胞研究中,线粒体拷贝数相对于核基因组的比例是判断一个细胞是否属于**细胞的重要指标。在植物细胞中,尤其类似衣藻这种代谢效率特别高的物种,其细胞器拷贝数是否异于其他物种,是一个非常有趣的话题。研究者依靠修正SNVs使用的NGS数据计算三个基因组上mapping的reads,然后使用HmmCopy方法,结合基因组GC含量信息,计算获得细胞器基因组的拷贝数。发现衣藻线粒体拷贝数***高于叶绿体的拷贝数,这与其他植物物种中两者相对接近的结果迥异。天津植物叶绿体基因组小基因组测序价格采用二代Illumina Hiseq结合三代PacBio测序技术对样本DNA进行基因组测序。
内共生起源学说认为,线粒体和叶绿体分别起源于原始真核细胞内共生的能进行有氧呼吸的细菌和进行光能自养的蓝细菌。该学说认为真核细胞的祖先是一种体积巨大、不需氧的、具有吞噬能力的细胞.通过糖酵解获取能量。而线粒体的祖先是是一种革兰氏阴性菌,可以利用体内三竣酸循环的酶系和电子传递链在有氧条件下将糖酵解产生的**酸进一步分解,释放更高的能量。这种细菌被原始真核细胞吞噬以后,有可能在长期互利共生中演化形成了现在的线粒体。与此类似,叶绿体的祖先推测是原核生物的蓝细菌,即蓝藻。它被原始真核细胞摄入后,在共生关系中,逐渐演化为叶绿体。由于长期的互利共生,需氧细菌和蓝细菌逐渐失去了原有的一些特征,关闭、丢失或向宿主细胞核中转移了一些基因,形成了线粒体和叶绿体的半自主性。
叶绿体基因组楝科植物叶绿体揭示物种进化遗传标记:以无患子科Acerbuergerianum为外群的系统发育树显示4种新的楝科是印度楝(Azadirachtaindica)的单系姊妹进化枝。在这个分支内,Cedrelaodorata和Entandrophragmacylindricum聚类在一起,Khayasenegalensis和Carapaguianensis聚类到一起。那么楝科叶绿体基因组标签区(BarcodingRegion)存在哪些潜在的特异性cpDNA变异?这些变异有何意义?文章选取了五种楝科植物和五种非楝科物种(无患子目和蔷薇亚纲)cpDNA的matK基因(cpDNA保守基因之一,用于遗传条码)进行比较分析,旨在鉴定潜在的楝科。鉴定了16个SNP位置,其中五个楝科个体显示相同的核苷酸,其与相同位置的非楝科物种的核苷酸不同。在从GenBank下载的100个楝科物种的matK基因,序列多重比对进一步分析这16个SNP位置。其中三个SNP位于matK基因的3’-末端,编码C-末端与线粒体II内含子的结构域X同源的结构域,并且与N-末端区域相比具有更高的碱性氨基酸。潜在的楝科特异性SNP的进一步验证对木材或木制品的分类学差异具有很大意义。 小基因组测序用什么平台?
植物线粒体(pMtDNA)复杂性概况
1. 相比于动物线粒体基因组的大小(10-20k),已知的pMtDNA大小变异非常剧烈,从190k-11Mb不等
2. 重复序列变异范围**片段结构变异很常见
3. pMtDNA中基因的SNP同义突变率很低,***低于动物线粒体与核基因
4. 越来越多的证据表明:开花植物的pMtDNA并不一定是环状,而是以线性状态或者多种形式共存于细胞中,而且不同生长时期还能相互转变
5. 除了参与能量代谢,pMtDNA经常性与植物育性相关
6. 编码基因非常保守:24个**保守基因+17个变异基因,但是保守基因的order可不保守哦,嘻嘻~
7. 经常可以注释到大量novel genes,部分基因的功能非常重要,影响植物生育周期与育性 小基因组测序服务推荐云生物。浙江植物叶绿体基因组小基因组测序服务
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编码基因分析:基因是控制生物性状的遗传单位,即一段具有遗传效应的功能性DN**段。它通过指导蛋白质的合成来表达自己所携带的遗传信息,从而控制生物个体的性状表现,特有基因的存在导致个体有特殊的功能。研究基因是研究生物个体的首要目标。我们采用同源比对预测和Denovo预测相结合的方法对样本基因组进行基因预测。我们利用参考基因组的蛋白序列来进行同源比对预测,先把蛋白序列快速比对到样本基因组序列,过滤不好的比对结果,去冗余,然后运行Genewise做精确比对。AUGUSTUS软件可对线粒体/叶绿体基因组进行Denovo基因预测。***对基因集进行校正、整合,得到样品基因组编码基因。 浙江植物叶绿体基因组小基因组测序服务