香港濒危物种精子分析BCF

方法:使用两种已知浓度的质控乳胶珠溶液,1份浓度为(35±5)×106/ml,另1份浓度为(18.0±2.5)×106/ml,评价4种计数方法的准确性和精确性,并比较4种方法计数精液的结果。结果:计数乳胶珠时,CellVU计数池的结果**接近已知浓度,分别为(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,变异系数(CV)值分别为12.80%和10.58%;血细胞计数池和Makler计数池结果均高于已知浓度,前者为(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分别为10.81%和8.89%,后者为(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分别为14.86%和14.96%;CASA系统结果低于已知浓度,为(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比较低,分别为7.22%和6.50%。计数精液时,CellVU计数池与CASA系统结果差异无***性(P=0.71),分别为(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血细胞计数池和Makler计数池结果差异无***性(P=0.14),分别为(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU计数池、CASA系统与血细胞计数池、Makler计数池结果间差异***(P<0.05或P<0.01)。结论:计数精液时,CASA系统与CellVU计数结果差异无***性。各实验室可选择合适的手工或CASA计数方法。Hamilton Thorne自动精子分析仪具有高精度、高效率和自动化的优点。香港濒危物种精子分析BCF

精子分析仪是计算机技术和图像处理技术结合的**分析仪器设备，通过显微镜下摄像和计算机快速分析多个视野内精子的运行轨迹，客观记录了精子的密度、活动力、活动率和存活率等各项参数。计算机辅助**分析仪由硬件系统和软件系统组成。硬件系统主要由显微摄像系统、图像采集系统、恒温系统、计算机处理系统等四大系统构成。此外，仪器一般配有**样品盒，以确保单层取样[1]。1.显微摄像系统：由显微镜及CCD组成。可以将标本信号通过显微放大由CCD传输到计算机2.图像采集系统：由图像卡构成，其功能是对CCD信号进行抓拍、识别、预处理后，将成熟信号输送到计算机。3.恒温系统：由加温和保温设备组成。加温是通过热吹风机不断将适宜的温度热风鼓入封闭保温罩内，提供稳定、可靠的检查环境。4.计算机系统：对图像信号进行***系统的加工处理，对获得的数据进行输出和存储的设备。软件系统采用**的精子质量分析软件，利用现代化的计算机识别技术和图像处理技术，对精子的动静态特征进行***的量化分析，对精子的密度、活力、活率、运动轨迹等特征进行量的检测分析北京人精子分析频闪光源Hamilton Thorne精子分析仪具有快速、高效、智能化的特点，能够满足用户对精子分析的多方面需求。

人类精子冷冻保存和储存：增加了冷冻样本的安全性、精液冷冻保存方案、快速液氮熏蒸冷冻、冷冻精液的解冻、玻璃化冷冻等内容，更具可操作性。本手册对人类精子的冷冻保存提出了具体建议：将样本分管分罐分开储存；对使用的材料和留存标本建立定期核验程序；所有储罐都应有液位监控报警系统，以监测温度和液氮液位，传感器应连接警报器，可通过实验室人员的终端进行提醒。新证据表明，玻璃化冷冻是冷冻保存精液的一种有价值的方法。该方法的原理是将小体积样本与无污染液氮直接接触并快速冷冻，可以防止冰晶的形成，并减少精子的渗透性损伤。在麦管玻璃化冷冻(无菌玻璃化冷冻)中，也可以使用封闭系统，不需要无菌的液氮。

精液显微镜检查(1)精子存活率：排精后30～60分钟，正常精子存活率应为80%～90%，精子存活率降低是导致不育的重要原因。(2)精子活动力：指精子活动状态，也是指活动精子的质量。世界卫生组织(WHO)推荐将精子活动力分为4级：①精子活动好，运动迅速，活泼有力，直线向前运动；②精子活动较好，运动速度尚可，游动方向不定，呈直线或非直线运动，带有回旋；③精子运动不良，运动迟缓，原地打转或抖动，向前运动能力差；④死精子，精子完全不活动。正常精子活动力应在③级以上，若＞40%的精子活动不良(③、④)级，常是导致男性不育的重要原因。精子活动力低，主要见于精索静脉曲张、泌尿生殖系统非特异性***，应用某些药物如抗疟药、雄***等所致。CASA系统操作简便，检测速度快，且重复性优于人工检测。

精子分析仪使用注意事项1.样品制备是CASA取得高质量检查结果的关键。CASA采用深度为10um样品池，能保证精子在单层界面内自由运动。取样分析前标本必须充分混匀，用微量取液器取5~7ul**加入样品池中，用0.5mm厚皿盖片盖紧。2.不洁净的计数池可影响精子的活力，尤其影响灰度CASA精子计数的准确性。3.精子样品密度过大时，造成图像处理上的粘连，无法分析每个精子的运动特性。**中所含精子太少时，需增加检查视野数量或者使用低倍物镜观察，以提高样品检出率。CASA系统主要用于精子动力学的分析，可以评估精子的浓度、活力等参数。上海计算机辅助精子分析DCL

CASA系统可以给出多种精子运动状态的参数，这些参数能够帮助更有效地了解精子的运动特性。香港濒危物种精子分析BCF

通过结果的生物学意义对结果质量进行评估‚当所有具生物学意义的参数在测试中表现出较小的可变性时则方法学可变性亦较低方法学可变性低则结果质量就高。CASA系统获得的数值与直观评估获得的数值进行分析和比较在精子数量和综合运动性上具有较好的相关性而·131·中国优生与遗传杂志2002第10卷第6期DOI:10．13404／j．cnki．cjbhh．2002．06．091在前向运动精子百分率上的相关性较低］。Holt等报道了在常规实验条件下采用五种不同的CASA系统对**参数值进行比较，其结果为：采用同一个测定池由不同的操作者测定**参数；变异系数（CV）是29％‚活动精子比率的CV为24％‚平均路径速度（VAP）的CV为43∙85％。作者们指出该分析结果不应看作是不同CASA系统间的工作情况的比较‚实际上它揭示了操作者的错误是差异的主要来源。目前有待于寻找进一步的标准来评估CASA变量的结果质量。精子***的生物学功能是使卵细胞授精‚因此用夫妇中的授精结果来考察精子运动性是合理的‚只有在该基础上能够确定活动性参数的重要性。辅助生殖技术（授精IVF）的发展使检测精子质量与各参数间的关系的比较成为可能；同样可以验证CASA测定结果与精子真实质量间的相关性有利于CASA结果质量的提高。香港濒危物种精子分析BCF