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定量测定是医学发展的重要保证。WHO1980年出版了男科实验室手册***版及以后版本[1]对有关男科的实验进行了详细的阐述。对计算机辅助精子分析进行质量管理包括:计算机本身的软硬件、CASA分析结果、工作人员的具体操作几方面。CASA参数包括精子数量和各种活动力变量其质量包括所测得数据的可靠性、精确度、如何避免差错和数据的正确性及确认以及分析中的标准[2]。CASA质量管理关系到男科实验室中**分析的质量具有以下特点:⑴在实验室内部质量和医生处置质量方面优于其它测定精子运动的方法;⑵CASA结果及结果质量的评估较困难;⑶WHO标准是医生处置质量保证的基础;⑷今后应加强操作人员的培训。CASA系统可以给出多种精子运动状态的参数,这些参数能够帮助更有效地了解精子的运动特性。北京牛精子分析STR

1.基本检查:是确定精液变量稳定的常规方法,不仅是男科实验室,任何开展精液检查的实验室都能遵循。精子计数依然推荐使用改良Neubauer血细胞计数板的方法,但计数的方法有了改变。明确推荐了伊红笨胺黑染色法作为精子存活率诊断的优先方法,伊红染色和低渗肿胀实验只作为备选方法。删减了参考值下限的描述。对于精子活动率大于40%的样本没有必要做存活率评估。与第5版手册中淡粉色判读为活精子不同,明确了只有精子头为白色的精子为活精子、淡粉色为死精子。临床数据表明,鉴别快速前向运动精子非常重要。因此,关于精子活力分级,第6版手册建议恢复到快速前向运动、慢速前向运动、非前向运动和不活动4个活力级别,但精子活动率的参考值范围却依然是按前向运动(PR)、非前向运动(NP)、不活动(IM)3个活力级别计算。第6版手册强调,精子形态学评估的价值不仅在于其可用于判断自然妊娠和辅助生殖技术(ART)结局的预后,还可以为男性生殖***包括睾丸和附睾功能判断提供更多诊断信息。对于3%和5%的精子“正常”形态率的判断,则要求必须由训练有素的人员评估1500个精子来完成;对于无尾精子(只有头部的精子)超过总精子数20%的精液,应单独计算并在报告中注明;上海绵羊精子分析WOB所有操作人员都应接受规范的CASA分析仪使用培训,严格按照使用指南进行操作。

男科实验室中通常所指的质量包含三个方面:实验室内部质量、医生处置的质量以及结果的质量[3]。1.实验室内部质量与**分析有关的实验室内部质量主要是工作人员的素质和所采用仪器的质量。工作人员应经过特殊的培训仪器必须处于正常状态、确保准确的结果操作应符合规程[4]。CASA系统本身的质量难于评定。硬件如显微镜、影像摄影机和计算机经检查便可确定其可靠性。但软件并非如此软件中存在不确定的因素算法是软件中**重要的部分通常制造者保守这些秘密;因此有关软件的数学上、信息性的、统计学的或生物测量方面的检查实验室难于进行。
CASA,即计算机辅助精子分析,是一种利用技术手段对精子活力、浓度和形态进行精确评估的方法。WHO第五版指南强调,相比人工检测,CASA提供更准确的数据和精子动力学参数,如前向运动和超活化运动,以及获能精子特征参数。研究显示,CASA检测的精子参数与体内外受精成功率和受孕时间有***关联。使用CASA分析仪,通常通过相差显微镜识别活动精子,适用于精子动力学分析。但要确保可靠结果,操作者需注意标本制备、帧频率、精子浓度等因素。每份样本至少需要分析200个活动精子的运动轨迹,更多精子样本有助于分类和变异性的分析。国内已有自主研发的精子分析仪,通常进行两次分析,每次至少200个精子,结果通过统计学分析得出。CASA在评估精子浓度时,需精确测量精子体积,确保**完全液化并充分混匀。计数板的精确性和计数一致性是关键,每次检测需满足5个视野和200条以上精子的比较低要求。对于高浓度**,可能需要稀释以减少误差。形态分析方面,CASA能够定量评估精子头部、中段和主段,尾部缺陷可通过活力评估。对于碎片过多或黏稠的**,可能需要洗涤以减少背景干扰。CASA中涉及一系列术语,如VCL(曲线速度)、VSL(直线速度)等,它们反映了精子运动的不同特性。男性精液检测主要依赖计算机辅助精子分析仪(computer assistant semen analyses,CASA)。

CASA可将每个精子的活力按以下分级:(1)前向运动型(PR):精子运动活跃、线性运动或者在较大的范围内运动。(2)非前向运动型(NP):所有其他非前向运动的形式,如精子在较小的范围内运动,精子头部轻微移位或只观察到尾部摆动。(3)完全不动型(IM):精子完全不动。CASA系统检测的这些参数有一套标准的术语。(1)VCL=曲线速度(mm/s)。精子头沿其实际的曲线,即在显微镜下见到的二维方式运动轨迹的平均速度。检测细胞活力。(2)VSL=直线速度(mm/s)。根据精子头在开始检测时的位置与***所处位置之间的直线运动的时间平均速度。(3)VAP=平均路径速度(mm/s)。精子头沿其空间平均轨迹移动的时间平均速度。(4)ALH=精子头侧摆幅度(mm)。精子头沿其空间平均轨迹侧摆的幅度。以侧摆的最大值或平均数值表示。(5)LIN=直线性。曲线轨迹的直线性。即VSL/VCL。(6)WOB=摆动性。精子头沿其实际轨迹的空间平均路径摆动的尺度。即VAP/VCL。(7)STR=前向性。空间平均路径的直线性。即VSL/VAP。(8)BCF=鞭打频率(Hz)。精子曲线轨迹越过其平均路径轨迹的时间平均速率。(9)MAD=平均移动角度(度)。精子头沿其曲线轨迹瞬间转折角度的时间平均***值。CASA系统主要用于精子动力学的分析,可以评估精子的浓度、活力等参数。上海绵羊精子分析WOB
精子分析系统较传统的分析法比较,具有速度快、量比性好、准确性高、为临床和科研提供客观的检测依据。北京牛精子分析STR
医生处置质量是指诊断质量是以当今医学科学知识、技术为基础依据症状来完成的。CASA系统可以为医生提供优于传统精子分析的手段和快速准确的分析结果[5]。CASA在医生处置质量方面的特点在于:①当CASA系统的参数设定和样品的处理方式(温度、稀释法、缓冲液)确定时通过个体内和个体间的比较CASA的精子活力重复性明显好于直观评估[6]。②实验室数据资料是质量的一部分CASA系统所有数据都是直接在线获得的因此明显优于其他方法[6]记录传递到数据库的过程无错误发生可清楚准确地打印出结果。所有的数据可直接转换到数据库、能够对***前和***后测定的数据进行统计学比较[9]、质量控制数据的采集与保存、每天的标本测试记录以及许多其他报告等等如此大量数据的处理只有在计算机中才能完成。但是CASA系统的参数设定也许限制了其质量特别是在精子形态学检查中通过CASA系统对精子形态学特征进行分析[7]这些特征(细胞大小、形状、光学密度、尾的存在以及其它)可由操作者选择这样就会引起同一标本在不同实验室或不同分析者测得的结果一致性较差[8]。就形态学分析而言传统方法的可变性远远大于CASA分析。北京牛精子分析STR
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