无需染色纺锤体提高冷冻保存效率

时间:2025年02月12日 来源:

Oosight影像分析系统采用液晶偏光成像技术,无需对卵母细胞进行染色,即可实时、清晰、高对比度地进行纺锤体结构和透明带成像,对ICSI、核移植操作、卵母细胞质量评价等有很好的辅助作用。

主要应用ICSI:在单精胞浆注射过程中定位初级卵母细胞,避免卵的破裂损伤,增强胚胎的发育潜能。卵评估:利用定量的分析数据对卵进行分级,改善对胚胎的选择。体外成熟评估:在未成熟卵催化(IVM)过程判断成熟期,判断依据采用的是准确的识别纺锤体,而非不准确的极体。质量控制:利用定量的分析数据对卵进行分级,改善对胚胎的选择。

核移植:显著提高核移植的成功率。由于在核摘除的过程可以清楚的看到核质,使得核移植的成功率增加了80%,并减少了线粒体DNA的摘除。卵冷冻研究:对冷冻的初级卵母细胞进行解冻前和解冻后的定量分析,从而判断卵的发育力,改善妊娠率。纺锤体研究:检测胚胎中纺锤体的发育过程,确定正常和非正常分裂率(只可用于搭配有培养箱的显微镜)。可以对染色体非正常的或非整倍体的胚胎成像,从而选择***的前体做PGD诊断。透明带研究:测量卵母细胞的透明带;准确测量纺锤体和透明带中分子排列方向的差别变化,判断纺锤体和透明带是否处于正常状态 纺锤体微管的排列方向决定了染色体分离的方向。无需染色纺锤体提高冷冻保存效率

无需染色纺锤体提高冷冻保存效率,纺锤体

纺锤体生成在含中心体的细胞中,纺锤体的生成开始于细胞分裂前初期-即在细胞核膜分解(NuclearEnvelopeBreakdown,NEB)之前。初期的结构为两个**的以中心体为核的星状体(asters)。当细胞核膜分解后,染色体和星状体发生一系列复杂的互动反应。**终结果为所有的染色体在纺锤体的**(赤道板,)排列整齐,每两条染色体有一个着丝点,每一个着丝点被一束极性相同的微管(通常称为纺锤丝)附着。此时细胞处于分裂中期,纺锤体生成完毕。实验证明,中心体在这个过程中的作用不是必需的。动物细胞在中心体被激光捣毁后仍旧能够筑构纺锤体,但其位置通常不在细胞的大致几何中心,其后的胞质分裂也会受严重影响。纺锤体[1]在不含中心体的细胞中,纺锤体的生成是由染色体本身主导的。此过程由一小分子量的GTP连接蛋白(RanGTPase)控制。细胞核分解后,纺锤丝由染色体周围生成。其后这些纺锤丝会在动力分子与为微管动力的合作影响下自动排列为极性相反大致数目相同的两组。每组的极性相对于一组着丝点。同时在微管远端的动力蛋白dynein会将这些微管束集中到一点,形成纺锤极区(SpindlePolarZone)。与此同时,染色体会自动在赤道板排列整齐。纺锤体生成完毕。昆明非侵入式成像纺锤体加热台纺锤体在细胞分裂中的精确调控是生物体发育的基础。

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    微管蛋白的突变和异常磷酸化是导致纺锤体功能障碍的主要原因之一。微管蛋白是构成微管的基本单元,其稳定性和功能对于纺锤体的组装和染色体的分离至关重要。微管蛋白的突变和异常磷酸化会影响微管的动态平衡,导致纺锤体的组装异常和染色体分离错误。纺锤体功能障碍会导致染色体不稳定,增加基因组的不稳定性。染色体不稳定会影响基因的表达和功能,导致细胞周期紊乱和细胞凋亡。在神经退行性疾病中,染色体不稳定会导致神经元的基因表达异常,进一步加剧神经元的损伤和死亡。

    帕金森病是一种以多巴胺能神经元丢失为主要特征的神经退行性疾病,其主要病理特征是α-突触蛋白的异常聚集。研究表明,纺锤体功能障碍在帕金森病的发生和发展中也起着重要作用。帕金森病患者中,微管蛋白的突变和异常磷酸化会影响微管的稳定性和纺锤体的组装,导致染色体分离异常和细胞周期紊乱。纺锤体功能障碍会影响线粒体的正常运输和分布,导致线粒体功能障碍,进一步加剧神经元的损伤和死亡。纺锤体功能障碍会导致细胞周期紊乱,增加细胞凋亡的风险,加速神经元的丢失。 纺锤体的异常可能与人类衰老和疾病的发生有关。

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    近年来,随着成像技术的飞速发展,特别是纺锤体成像技术的不断进步,科学家们得以在高分辨率下观测细胞分裂过程,从而揭示了纺锤体的许多未知特征和机制。纺锤体成像技术的发展可以追溯到上世纪末,当时科学家们开始利用荧光显微镜技术观测细胞分裂过程。然而,由于传统荧光显微镜的分辨率限制,纺锤体的精细结构和动态变化往往难以被清晰捕捉。为了克服这一难题,科学家们开始探索更高分辨率的成像技术,如电子显微镜、超分辨率显微镜等。然而,这些技术在实际应用中面临着诸多挑战,如样品制备复杂、成像速度慢、对细胞活性影响大等。近年来,随着成像技术的不断创新和进步,纺锤体成像技术取得了突破性进展。特别是超分辨率显微镜技术的出现,如结构光照明显微镜(SIM)、受激辐射损耗显微镜(STED)和单分子定位显微镜(SMLM)等,使得科学家们能够在纳米尺度上观测纺锤体的精细结构和动态变化。 研究纺锤体的结构和功能有助于深入了解细胞分裂的复杂机制。上海MII期纺锤体纺锤体结构

纺锤体微管的动态变化是细胞分裂过程中引人注目的现象之一。无需染色纺锤体提高冷冻保存效率

    纺锤体在有丝分裂中发挥着至关重要的导航作用,其主要功能包括:排列与分裂染色体:纺锤体的完整性决定了染色体分裂的正确性。在细胞分裂中期,染色体在纺锤丝的牵引下,自动在赤道板排列整齐。当细胞进入分裂后期,纺锤体微管收缩,将染色体牵引至两极,形成两组数目相等的姐妹染色单体。这一过程确保了遗传信息的准确传递,避免了染色体分离错误导致的遗传异常。决定胞质分裂的分裂面:在染色体分裂的同时,纺锤体中的一部分微管不随染色体分裂到两极,而是停弛在纺锤体中间形成纺锤中心体。纺锤中心体的中心区域为两组极性相反的微管交叠区,称为纺锤中心区,它决定了接下来的胞质分裂面。胞质分裂开始于分裂后期的较晚期,一般结束于分裂末期后1-2小时,此期间两个子细胞由中心颗粒体连接。纺锤体通过精确控制胞质分裂面的位置,确保了细胞分裂的对称性和稳定性。 无需染色纺锤体提高冷冻保存效率

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