上海哺乳动物纺锤体提高冷冻保存效率

    纺锤体的精密导航作用主要体现在以下几个方面：微管的动态生长与缩短：纺锤体微管的动态生长和缩短是纺锤体形态变化的基础。这种动态变化不仅使纺锤体能够适应不同阶段的细胞分裂需求，还能够确保染色体在分裂过程中的精确定位。动粒微管与染色体的结合：动粒微管与染色体动粒的结合是纺锤体牵引染色体的关键步骤。动粒微管通过驱动蛋白和动力蛋白的介导，与染色体动粒紧密结合，从而实现了染色体在纺锤体中的精确定位和牵引。纺锤体微管的极性排列：纺锤体微管的极性排列决定了染色体分裂的方向和胞质分裂面的位置。纺锤体微管从两极向中心区域延伸，形成类似纺锤的形状，确保了染色体在分裂过程中能够沿着正确的方向分离。同时，纺锤中心体的形成也决定了胞质分裂面的位置，使细胞分裂更加对称和稳定。纺锤体组装检查点的调控：纺锤体组装检查点是细胞周期调控中的重要环节，它确保了纺锤体在分裂过程中的完整性和准确性。当纺锤体组装不完全或染色体动粒未能被所有动粒微管捕获时，纺锤体组装检查点会被激发，阻止细胞进入分裂后期。这种调控机制避免了染色体分离错误导致的遗传异常和细胞死亡。 纺锤体的异常可能导致遗传信息的丢失或重复，进而引发遗传性疾病。上海哺乳动物纺锤体提高冷冻保存效率

卵母细胞的冷冻保存技术一直是研究的热点之一，特别是针对不同成熟阶段的卵母细胞，如MI期卵母细胞的冷冻保存。MI期卵母细胞具有独特的生物学特性和发育潜能，其纺锤体的稳定性和形态对于后续的受精和胚胎发育至关重要。因此，针对MI期纺锤体卵冷冻的研究不仅具有理论价值，更具有重要的临床应用前景。MI期卵母细胞的纺锤体由微管组成，这些微管结构精细且脆弱，容易受到冷冻过程中温度变化和渗透压变化的影响而发生损伤。纺锤体的损伤不仅会影响卵母细胞的正常发育，还可能导致受精失败或胚胎发育异常。ICSI纺锤体纺锤体结构纺锤体的研究对于开发新的抗病毒药物具有重要意义。

Oosight影像分析系统采用液晶偏光成像技术，无需对卵母细胞进行染色，即可实时、清晰、高对比度地进行纺锤体结构和透明带成像，对ICSI、核移植操作、卵母细胞质量评价等有很好的辅助作用。

主要应用ICSI：在单精胞浆注射过程中定位初级卵母细胞，避免卵的破裂损伤，增强胚胎的发育潜能。卵评估：利用定量的分析数据对卵进行分级，改善对胚胎的选择。体外成熟评估：在未成熟卵催化（IVM）过程判断成熟期，判断依据采用的是准确的识别纺锤体，而非不准确的极体。质量控制：利用定量的分析数据对卵进行分级，改善对胚胎的选择。

核移植：显著提高核移植的成功率。由于在核摘除的过程可以清楚的看到核质，使得核移植的成功率增加了80%，并减少了线粒体DNA的摘除。卵冷冻研究：对冷冻的初级卵母细胞进行解冻前和解冻后的定量分析，从而判断卵的发育力，改善妊娠率。纺锤体研究：检测胚胎中纺锤体的发育过程，确定正常和非正常分裂率（只可用于搭配有培养箱的显微镜）。可以对染色体非正常的或非整倍体的胚胎成像，从而选择***的前体做PGD诊断。透明带研究：测量卵母细胞的透明带；准确测量纺锤体和透明带中分子排列方向的差别变化，判断纺锤体和透明带是否处于正常状态

染色体当细胞从间期进入有丝分裂期，间期细胞微管网络解聚为游离的αβ-微管蛋白二聚体，再重组成纺锤体，介导染色体的运动；分裂末期纺锤体微管解聚，又重组形成细胞质微管网络。可分为：动粒微管：连接染色体动粒于两极的微管。极间微管：从两极发出，在纺锤体中部赤道区相互交错的微管。星体微管：中心体周围呈辐射分布的微管。染色体的运动依赖纺锤体微管的组装和去组装。在这一过程中动粒微管与动粒之间的滑动主要是依靠结合在动粒部位的驱动蛋白和动力蛋白沿微管的运动来完成。极微管在纺锤体中部交错，有些分布在极微管之间特殊的双极马达蛋白，其中2个马达蛋白沿一条微管运动，另2个马达结构域沿另一条微管运动。由于2条微管分别来自二极，故极性相反。当双极驱动蛋白四聚体沿微管向正极运动时，纺锤体二极间距离延长。反之纺锤体距离缩短。纺锤体由微管组成，其动态变化调控着细胞分裂的进程。

正常情况下，成熟的神经元处于G0期，不会重新进入细胞周期。然而，纺锤体功能障碍会导致细胞周期紊乱，使神经元重新进入细胞周期。由于纺锤体功能障碍，神经元无法完成正常的细胞分裂，导致细胞凋亡。细胞周期重新进入是神经退行性疾病中神经元丢失的一个重要机制。纺锤体功能障碍会影响线粒体的正常运输和分布，导致线粒体功能障碍。线粒体是细胞的能量工厂，其功能障碍会导致能量代谢紊乱，进一步加剧神经元的损伤和死亡。在帕金森病中，线粒体功能障碍是导致多巴胺能神经元丢失的重要机制。研究纺锤体有助于理解细胞分裂的分子机制。北京克隆纺锤体Hoechst染料

纺锤体微管网络的复杂性保证了染色体分离的准确性。上海哺乳动物纺锤体提高冷冻保存效率

纺锤体观测仪在补救ICSI中的应用我们知道，成熟的卵母细胞含有1个极体，也就是***极体。IVF加入精子后，精子会穿透层层障碍**终进入卵子，随着时间的推移，～6小时后卵子的纺锤体会将染色单体拉向两极，进而排出第二极体，再往后大约加精后9～16小时，雌雄原核会出现，而原核的出现才是受精的标志。但是对于那些没有受精的卵子，到了原核出现的时间窗发现没有受精时再去补救ICSI，往往错过了卵子的比较好受精时间，因为没有受精的卵子会在体外老化，即使受精，胚胎的发育潜能也很低。所以，我们在加精后的4～6小时，通过观察第二极体的排出来初步判断是否受精，**的增加了那些受精障碍患者的受精率，也避免了卵子的老化。当然，偶尔也会出现错误补救。文献报道对IVF受精后的未排出第二极体的卵母细胞进行补救，实验组用纺锤体观测仪观察并统计纺锤体的数目，82.7%含有一个纺锤体，17.3%含有两个纺锤体，并对含有一个纺锤体的卵母细胞进行补救ICSI；而对照组并未用纺锤体观测仪观察纺锤体，只对未排出第二极体的卵母细胞进行补救ICSI。结果发现使用纺锤体观测仪观察纺锤体的数目能显著提高正常受精率，降低多原核受精比率。上海哺乳动物纺锤体提高冷冻保存效率