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医院检验中心糖原染色操作规程:1.雪夫氏试剂:400m1蒸馏水煮沸除去C02,逐渐加碱性品红2.08溶解后,待冷却至60℃,加1mm01儿HCl40ml,再加偏重亚硫酸钠(NaHSO:)4g,次日加活性碳1.5g,放置半天后过滤。配好后液体为无色透明,保存于4℃冰箱中。2.过碘酸作用液:过碘酸1g溶于蒸馏水100ml中,或取过碘酸钾(1tI04)0。698加蒸馏水100ml,微加热使溶解,再加浓硝酸0.3m1,置冰箱中保存。3.固定液:95%乙醇90ml与甲醛10m1混匀。4.20g/l甲基绿:甲基绿2g溶于100m1蒸馏水。[操作]_x005f_x000c_(1)新鲜或陈旧血片、骨髓片于固定液内10分钟。(2)水洗数次后,对照片先用唾液消化30分钟,也可在同一片,在其中间用蜡笔划界,一半做对照,另一半做测定。(3)水洗后,滴加过碘酸数滴于涂片上,作用10分钟后,再水洗数次。对盐基性染料有亲合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污秽蓝色。江西口碑好的糖原染色试剂盒报价

糖原染色试剂盒。含乙二醇基的多糖经过碘酸氧化,产生醛基,与雪夫(Schiff)试剂中无色品红结合,形成紫红色沉淀物定位于含糖原的胞浆中。该反应称为碘酸-雪夫(PAS)反应。(1)雪夫液配制:碱性品红1g溶于200ml沸水中,冷却60℃时过滤,加1mmol/L盐酸20ml,再冷却至25℃左右,加偏重亚硫酸钠(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗处24h,无色即可放冰箱中保存,呈微红色,则加活性炭1~2g,吸附过滤使成无色液体,放冰箱中保存。若溶液变红,即不能再用。(2)10g/L过碘酸水溶液:过碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸馏水至10ml。上海正规糖原染色试剂盒厂家批发价糖原的固定要及时,而且标本要新鲜。

临床意义:1.急性白血病类型的鉴别红白血病的幼红细胞PAS染色多呈阳性反应,阳性率高,反应强;成熟红细胞有时亦可为阳性;急性淋巴细胞白血病的原、幼淋巴细胞PAS染色多为红色颗粒或块状阳性反应;急性粒细胞白血病的原粒细胞呈阴性或胞质呈弥漫淡色阳性反应;急性早幼粒细胞白血病异常早幼粒细胞的PAS染色为阳性反应;急性单核细胞白血病原、幼单核细胞PAS染色阳性反应呈弥漫分布的红色细颗粒,巨核细胞白血病原巨核细胞PAS染色呈阳性或强阳性反应,表现为红色颗粒或块状。2.各类贫血的鉴别MDS、缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血(曾称地中海贫血)的幼红细胞PAS染色多为阴性反应,有时可出现阳性反应;巨幼红细胞贫血、溶血性贫血、再障的幼红细胞PAS染色为阴性。
特染的应用价值:现代病理学中免疫组织化学技术、电子显微镜技术以及其它细胞及分子生物学技术应用日益普遍,但由于这些技术要求一定的实验条件以及所需的试剂价格较为昂贵,对于一部分病人以及某一些基层医院是比较难以接受的。而组织化学技术则具有无需复杂的实验条件以及较为昂贵的试剂操作又比较简单的优势,在临床病理学诊断中具有重要的应用价值。比如,当细胞中出现色素,是黑色素还是含铁血黄素以及当组织中出现均一化学物质是否为淀粉样变性等,用组织化学技术区别起来很简单,所以组织化学技术,虽然已有几十年到几百年的历史,仍是一个很有实用价值的技术~主要用来显示糖原和其他多糖物质,因此也称作糖原染色。

糖原D-PAS染色液注意事项:1、切片脱蜡应尽量干冷,否则影响染色效果。需使用一张阳性对照片验证酶的活性。2、过碘酸氧化时间不宜过久,氧化时温度以18~22℃较佳。3、试剂(A)、试剂(B)、试剂(C)、应置于4℃密闭保存,使用时避免接触过多的阳光和空气,使用前较好提前取出恢复到在室温后,避光暗处使用。4、酸性乙醇分化液应经常更换新液,其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性乙醇分化液的新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够。5、在过碘酸溶液和SchiffReagent中作用时间非常重要,该依据切片厚薄、组织类别等决定。6、况冶切片染色时间尽量要短。切片脱蜡应尽量干净,否则影响染色效果。北京口碑好的糖原染色试剂盒进货价
可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。江西口碑好的糖原染色试剂盒报价
糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面:PAS染色时需于暗处加盖反应,染色时间10~20min(染色时间长短取决于试剂的质量和环境温度,SO浓度高,染色时间适当缩短;环境温度高,染色时间也应适当缩短,反之则需适当延长反应时间)。染色过程中不能接触伊红,以免造成颜色误差[4]。作糖原染色时,较好作消化对照,即取两张连续切片,其中一张脱蜡至水后,用1%淀粉酶于37℃消化30min,水洗后与不经消化处理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,如经消化处理的切片染色阴性,不经消化处理的切片染色阳性,即肯定为糖原[6]。偏重亚硫酸钠(钾)溶液配置后,不能保存,因此,必须现配现用,用过一次即应废弃。各种试剂必须是化学纯或者分析纯。器皿、染色缸必须洁净而干燥。江西口碑好的糖原染色试剂盒报价
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