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染色的一般原则:1.荧光素产品一般为微量试剂,取用前请离心集液,以及避光保存和使用。建议您在收到产品之后,分装为小份避光保存于-20℃,即用即取。2.式细胞仪只可检测单细胞悬液,如使用组织样本,首先必须制备成单细胞悬液,细胞数量不应低于1X106/ml。3.推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。亚硫酸钠须有浓厚气味,器皿必须洁净而干燥。上海如何使用糖原染色试剂盒哪里买

PAS染色试剂配制及染色方法:1.材料与方1.1实验材料新鲜小白鼠肝脏、肾脏标本各30例,均来自我室实验材料。1.2主要试剂1.2.1AAF固定液又称酒精醋酸福尔马林混合固定液,其配方:无水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3过碘酸溶液0.5g过碘酸(HIO)溶于100mL蒸馏水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:过碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸钠0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4无色品红液(Schiff氏液)在三角烧内加入蒸馏水500mL,煮沸后,在保持微沸的情况下,加入碱性品红2.5g,并不断摇动约5min(勿使之沸腾),使碱性品红彻底溶解(溶解液为深红色)。冷却到50℃时,过滤,加入1N盐酸50mL,再待冷却至25℃时加入偏重亚硫酸钠2.5g,塞住瓶口,摇动容器以充分混合(此时颜色明显变淡),然后避光放置或冰箱内24h湖南品牌糖原染色试剂盒平均价格一般厚度不超过3mm,大小不超过5×5m㎡。

糖原染色试剂盒。含乙二醇基的多糖经过碘酸氧化,产生醛基,与雪夫(Schiff)试剂中无色品红结合,形成紫红色沉淀物定位于含糖原的胞浆中。该反应称为碘酸-雪夫(PAS)反应。(1)雪夫液配制:碱性品红1g溶于200ml沸水中,冷却60℃时过滤,加1mmol/L盐酸20ml,再冷却至25℃左右,加偏重亚硫酸钠(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗处24h,无色即可放冰箱中保存,呈微红色,则加活性炭1~2g,吸附过滤使成无色液体,放冰箱中保存。若溶液变红,即不能再用。(2)10g/L过碘酸水溶液:过碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸馏水至10ml。溶解后盖紧放冰箱备用,一般可用3个月,变黄则失效
PAS染色试剂配制及染色方法:1.材料与方1.1 实验材料新鲜小白鼠肝脏、肾脏标本各30例,均来自我室实验材料。1.2 主要试剂1.2.1 AAF固定液又称酒精醋酸福尔马林混合固定液,其配方:无水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2 Carnoy固定液 氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3 过碘酸溶液 0.5g过碘酸(HIO)溶于100mL蒸馏水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:过碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸钠0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4 无色品红液(Schiff氏液) 在三角烧内加入蒸馏水500mL,煮沸后,在保持微沸的情况下,加入碱性品红2.5g,并不断摇动约5min(勿使之沸腾),使碱性品红彻底溶解(溶解液为深红色)。冷却到50℃时,过滤,加入1N盐酸50mL,再待冷却至25℃时加入偏重亚硫酸钠2.5g,塞住瓶口,摇动容器以充分混合(此时颜色明显变淡),然后避光放置或冰箱内24h该依据切片厚薄、组织的类别等决定。

糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面:尽可能选取小块新鲜组织及时固定。糖原易溶于水,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,更易溶于水,固定之前决不能用水或生理盐水等浸洗。应避免用水溶性固定液,宜采用酒精性固定液,如Carnoy液,能较好地保存糖原,但有使糖原流动到细胞一侧的现象,多数人认为是由于固定剂把细胞内的糖原推向固定剂对组织浸透的方向而造成。其他组织应用中性福尔马林固定为佳。组织在4℃左右温度内固定与保存,是针对糖的性质和避免糖原溶于水而采取的相应措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白,亦能**白和糖原沉淀,但仍可溶于水,因此较好不单独使用乙醇固定,以乙醇为溶剂的混合固定液固定为佳冷冻切片染色效果不佳,成熟时间2个月,染色时间一般15-20分钟。天津哪家提供糖原染色试剂盒哪里买
拥有日本进口的各种染料,保证切片染色效果。上海如何使用糖原染色试剂盒哪里买
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蜡切片脱蜡至水。(2)0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液(过碘酸再结晶应重新配制使用)。(3)蒸馏水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分钟。(Schiff氏液从冰箱取出升至室温使用)(5)流水冲洗10分钟。(6)苏木素浸染细胞核2-3分钟。(7)脱水、透明、封盖。结果:糖原呈红色,细胞核呈蓝色。试剂配制:(1)0.5%过碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏试剂。碱性品红1g蒸馏水200ml1N盐酸(98.3ml比重1.16盐酸,加入蒸馏水成1000ml)20ml偏重亚硫酸钠或钾1g碱性品红1g加入200ml蒸馏水,搅拌加热沸腾,待冷却至50℃过滤,加入当量盐酸至25℃时加入偏重亚硫酸钠。置于暗处,两天后溶液变桔黄色或草黄色,然后加入少量活性碳并震荡、过滤,此时溶液应为无色。保存冰箱备用。溶液如显浅红色或草黄色,染色效果较差上海如何使用糖原染色试剂盒哪里买
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