福建酶的高通量筛选

开发一种新药的过程可能是漫长、复杂和不确定的，但从社会、科学和经济的角度来看，它也可能是高回报的。高通量筛选(HTS)已经成为药物发现的主要工具。，向大家介绍目前用于靶标确认的几种HTS方法，主要分为两大类:生化水平和细胞水平。生化水平分析包括比率荧光法（FA/FP）、荧光共振能量转移（FRET）、时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)等；细胞水平的分析包括细胞活力、报告基因、第二信使和高内涵成像等。生化筛选利用纯化的目标蛋白，在体外测定配体的结合或酶活性的抑制。这些检测通常在384孔板中以竞争的形式进行，其中所研究的化合物必须取代已知的配体或底物。荧光法由于其使用简便、灵敏度高和灵活性强等特点，广受科研人员的欢迎，主要有比率荧光法（FA/FP）、荧光共振能量转移（FRET）、时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)。高通量筛选的检测技术。福建酶的高通量筛选

我国进行药物高通量筛选的优势首先是化合物来源，且多为天然；其次是对化合物生物活性的筛选目的较明确，无目的合成的化合物较少；第三，我国传统药物为筛选研究提供了一个巨大的资源库，可从中药中提取分离筛选新的化合物。这些优势为药物的高通量筛选打下了坚实基础。我国药物高通量筛选初现规模：药物高通量筛选工作在我国起步较晚，且不规范。近几年，我国进行了外引内联的整体化、规模化基础建设，已初见成效。1996年中国医学科学院引进国内台Biomek2000型实验自动化工作站；1998年又引进台Topcount微量闪烁计数器，使放射配基实验、放射免疫实验等技术微量化、自动化。湖北细胞高通量筛选高通量筛选的实验方案。

蛋白质片段互补分析(PCA，也称为双分子荧光互补)和双杂交筛选允许检测细胞中蛋白质相互作用的形成/抑制。PCA将单个检测蛋白（荧光素酶、GFP、GAL）分成两部分，这些部分与感兴趣的蛋白质-蛋白质相互作用融合；如果伴侣结合，检测蛋白会重新形成并检测到信号。高内涵成像平台（HCS）由于其能够提供出色的单细胞分析功能和短的数据采集时间获得大家的青睐。一般的实验流程为设计实验并使用自动分液仪将细胞接种到96、384或1536孔板中；然后加入化合物，由于细胞在孵育过程中会对化合物做出反应，随后对细胞进行染色，并通过HCS成像系统获取图像，通过软件分析获取的图像以确定化合物的剂量反应。

荧光共振能量转移（FRET）是指在两个不同的荧光基团中，如果一个荧光基团（供体Donor）的发射光谱与另一个基团（受体Acceptor）的吸收光谱有一定的重叠，当这两个荧光基团间的距离合适时，就可观察到荧光能量由供体向受体转移的现象，即以前一种基团的激发波长激发时，可观察到后一个基团发射的荧光。常见的供体-受体对之间的有效距离通常为2-6nm，适用于许多蛋白质相互作用。染料通常是有机分子，如与蛋白质偶联的荧光素和罗丹明，或与感兴趣的蛋白质融合的荧光蛋白。细胞高通量筛选技术。

高通量药物筛选基于发现的靶点，构建合适的筛选模型，在分子水平和细胞水平上建立和优化各类稳健的筛选方法，以高密度的微孔板为实验载体，通过自动化设备或系统完成包括体系构建，孵育以及检测在内的整个实验过程，从而实现多个化合物库中数以千万的化合物的高通量筛选，并通过大量的数据分析筛选出潜在有价值的目标化合物。高通量药物筛选具有微量、快速、灵敏、准确的特点，是当代新药发现技术的重大进步，使全球各大医药公司和研究机构加快了药物研发的进程。药物高通量筛选的特点。湖北细胞高通量筛选

组合化学高通量筛选。福建酶的高通量筛选

然而传统的针对单一靶点的研究方法已经难以适应一些多基因疾病和病毒等相关药物的研究。而基于细胞水平的高内涵筛选(high content screening, HCS)技术实现了对化合物多靶点多参数的同时检测，从疾病相关基因调控通路和网络水平上研究药物的作用机制、代谢途径和潜在毒性等，也使在细胞水平评价活性化合物的成成为可能。从筛选载体上看，HCS和HTS并没有的区别，它的检测体积并未因检测指标增加而增高，操作步骤同样简单可行、可自动化。故HCS在新药研发中发挥越来越重要的作用。福建酶的高通量筛选

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