江西一个斑马鱼实验

时间:2021年04月23日 来源:

报告基因选用GFP或RFP,**小启动子来自斑马鱼gata2基因;将上述载体与体外转录得到的Tol2转座酶的mRNA共同注射到斑马鱼的单细胞受精卵中,受精卵长大后成为founder;Founder外交(out-cross)得到F1代胚胎,从中挑选出对于报告基因具有组织特异性表达模式的胚胎,拍照记录后分类培养;F1长大后通过linker-mediatedPCR的方法鉴定对应于GFP(或RFP)表达图式的Tol2插入位点,并通过与已知基因组数据比较,对插入位点进行定位与分析;通过外交纯化得到转基因鱼,直至得到只含有单个插入品系的转基因鱼。斑马鱼免疫系统个体发育。江西一个斑马鱼实验

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斑马鱼作为模式生物的优势


斑马鱼已广泛应用于生命科学领域的基础研究,也早已应用于化学品安全和环境毒理学监测领域。

二十世纪末以来,斑马鱼开始进入疾病研究和新药研发领域,并收到日益广泛的关注。

2003年,美国国立卫生研究院(NIH)将斑马鱼列为继小鼠和大鼠后第3大脊椎模式生物;

2009年,FDA和EMEA接受用斑马鱼进行的完全学药理学评价数据申报临床实验,标志着斑马鱼药物毒理学与安全性评价模型得到了欧美**的正式认可;

到了2015年,中国实验用鱼(斑马鱼)质量控制标准起草启动标志着斑马鱼模型在国内的兴起。 山西斑马鱼实验步骤斑马鱼基因功能研究实验模型。

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近十几年来,随着转基因技术的发展和应用,转基因斑马鱼也逐渐应用于水质监测,其对污染物的作用反应快,可在短时间内调查水污染状况或用于特定污染物的检测。将目标质粒注射到斑马鱼体内,斑马鱼经过筛选得到稳定的转基因品系,通过观察荧光蛋白可以用来快速检测不同的环境污染物:

银纳米粒子因其***作用而广泛应用于洗涤剂和废物处理领域,为了研究银纳米粒子对环境和健康的影响,来自新加坡国立大学化学系的研究者用斑马鱼作用模式生物评价了银纳米粒子对斑马鱼的毒性,结果显示银纳米粒子可造成斑马鱼胚胎死亡、体轴异常、脊索扭曲、血流减慢、心包水肿、心律不齐等:与常规物理和化学检测手段相比,应用斑马鱼进行环境监测和化学品研究能实现快速、高效、灵敏、成本低等优点。

形态特征


斑马鱼的透明性有助于原位观察其内部结构。它们的***具有与人类相同的主要特征,因此可以用来研究人类的发育过程。


斑马鱼胚胎也可以进行基因改造。斑马鱼与人类共有70%的基因,84%的疾病相关基因与斑马鱼有相似之处。。斑马鱼基因组已经完全测序,超过14万个基因已经突变,以研究它们在发育和疾病中的作用。


血肿


斑马鱼在造血研究中起着重要作用。这些鱼类具有与人类相同的连续多向造血过程,具有相同的不同谱系。因此,这个模型为科学家提供了许多关于血液谱系发育途径和血液紊乱的见解。 物质对淡水鱼 (斑马鱼) 急性毒性测定方法。

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斑马鱼模型现已在欧美国家广泛应用于人类疾病模型研究、新药筛选、药物毒性与安全性评价。目前国际上已有19个基于斑马鱼模型研发的药物(包括老药新用)已获得美国FDA的临床实验许可或上市许可,如PGE2、Lenaldekar、Thalidomide和Rosuvastatin等。诺华、辉瑞、罗氏、默克和阿斯利康等跨国医药巨头公司均通过自建或合作方式用斑马鱼进行药物早期研发,极大地推动了斑马鱼模型在药物研发应用中的标准化和规范化进度。由多个不同实验室进行的实验结果表明,斑马鱼模型对药物心血管毒性、发育毒性和胃肠道毒性等的评价结果与人体实验结果的一致性平均达到了80%以上(表2),按照欧洲选择性分析方法评价中心(ECVAM)的评价标准,大部分的预测准确率已达到了良好(75-85%)或***(85%)的水平。斑马鱼药物毒理学评价技术。陕西国内斑马鱼实验室

斑马鱼的遗传学研究实验。江西一个斑马鱼实验

心血管病


这些鱼类也主要用于研究心血管疾病,因为它们具有与人类胚胎相似的胚胎心脏结构。此外,斑马鱼的优点是能够在没有足够的心脏循环的情况下生存。


氧气进入斑马鱼胚胎,通过被动扩散到达其他组织。这种独特的特征有助于胚胎从初始阶段发育,尽管有心血管缺陷。他们在这一领域的应用的一个例子是探索炎症和心肌梗死之间的联系。


神经病学


由于人类和斑马鱼大脑中存在大量相似的信号蛋白,因此该模型也被***用于神经系统疾病的研究。几种人类神经系统疾病在这些鱼类中也有对应的疾病。


例如,独眼针头是斑马鱼的变种,它有一个较小的腹侧大脑,只有一只眼睛。这与人类疾病“无脑症”相比较,在这种疾病中,病人有一个小的大脑和一只眼睛。这种比较使得能够鉴定与这种状况相关的几个基因,例如CFC1。 江西一个斑马鱼实验

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