辽宁斑马鱼实验

安全性评价

斑马鱼在国际上已***应用于食品药品早期安全性评价和毒理学研究，辉瑞、默克、强生、阿斯利康等跨国医药巨头都在用斑马鱼进行药物早期安全性评价。FDA和EMA早在2009年就通过了对斑马鱼安全药理学数据的GLP检查。

中国重大新药创制专项自2012年开始将斑马鱼药物安全性评价技术列为了关键技术开发课题之一，并连续滚动支持。

斑马鱼在化学品安全性评价与环境毒理学评价领域的应用也已经非常***，OECD已经颁布了9项相关的指导原则，中国也已制订了10项相应的国家标准。环特根据OECD指导原则和中国的国家标准，提供一系列的斑马鱼化学品安全性和环境毒理学评价服务。 斑马鱼模型实验技术中心。辽宁斑马鱼实验

斑马鱼基因突变技术服务：包括插入诱变和ENU化学诱变技术。

斑马鱼转基因资源库和突变体资源库服务：包括研制、收集和分发各种斑马鱼转基因品系和突变体

信息服务：包括建立斑马鱼资源信息网络数据库和提供斑马鱼基因组生物信息学分析服务。

转基因斑马鱼的制备主要采用两种方法：通过Tol2转座子构建组织特异性表达报告基因的方法；利用特定基因的启动子/增强子驱动报告基因在特定细胞组织中表达的方法。

首先构建以Tol2转座子为基础的enhancertrap载体，

在放大的照片中可看到耳蜗内的毛细胞

在放大的照片中可看到耳蜗内的毛细胞 西藏斑马鱼实验动物模型斑马鱼体外细胞学等生物检测。

中国的斑马鱼技术发展从2010年之后进入了快车道，全国首届斑马鱼学术研讨会该年在杭州召开，同年，中国**斑马鱼技术服务公司环特生物在杭州成立。2011年，斑马鱼模型和技术研究被列入中国科技部“重大新药创制”专项十二五实施计划。2012年，中国国家斑马鱼资源中心（CZRC）成立，***本系统阐述斑马鱼模型评价药物安全性技术方法的专著也在同一年由Willey出版社出版。2013年，较早基于斑马鱼研究获得的候选药物进入美国临床Ⅱ期研究，中国国内***将斑马鱼临床前药理学评价资料用于CFDA创新药物临床试验申报。

斑马鱼作为免疫学新模式生物的优点在于：

（1）与传统的免疫学模式生物——小鼠相比，斑马鱼有体型小，子代数量多，培育要求低，易于养殖，饲养成本低，便于开展大规模研究。

（2）斑马鱼个体发育过程是在全透明状态下完成，使得整个心血管系统的发育过程能十分完整的被观察。特别是免疫系统个体发育的相关资料，是无法从小鼠上所进行的实验中轻易获得的。

（3）先期对斑马鱼的遗传学研究积累的丰富突变库也为研究免疫相关基因的功能提供了条件。

（4）在已知生物中，鱼类是**早具备获得性免疫系统的纲。 斑马鱼毒理学研究成果。

应用

视网膜修复

斑马鱼因为它具有自我修复破损视网膜的独特能力。人类视网膜中也拥有类似斑马鱼能够修复视网膜的细胞，并计划在5年内将研究结果用于失明患者***，让他们重见光明，这可能有助于***因视网膜受损引起的失明。

听觉修复

放大2.1万倍的耳蜗毛细胞

华盛顿大学西雅图一直在对斑马鱼进行研究，试图解决人类听力丧失的问题。和许多其他水生生物一样，斑马鱼在身体表面长有毛细胞。这些毛细胞的作用是探测水中的振动，其原理与人类内耳中的毛细胞相似。但是，与人类不同的是，斑马鱼的毛细胞在受损后还可以再生。研究人员希望他们的工作可以揭开谜底，保护人类的毛细胞免受损伤、并推动毛细胞的再生。

另一组研究试图了解导致斑马鱼、鸟类和老鼠的毛***的基因和其他分子。有一项研究发现了一种似乎可以让动物毛***的发育蛋白。在研究中一名团队成员发现了小鸡的毛细胞受损后体内一种蛋白质的含量（小鸡的毛细胞可以再生）有所上升。参与这些实验的科学家们说使用药物防止听力丧失的临床实验有可能会在十年内实现。但是找到利用毛******听力丧失的办法可能还需要至少20年的时间。 应用斑马鱼对临床前药物进行安全性与毒理性评价。辽宁斑马鱼实验

利用模式生物斑马鱼来研究肌肉再生。辽宁斑马鱼实验

报告基因选用GFP或RFP，**小启动子来自斑马鱼gata2基因；将上述载体与体外转录得到的Tol2转座酶的mRNA共同注射到斑马鱼的单细胞受精卵中，受精卵长大后成为founder；Founder外交（out-cross）得到F1代胚胎，从中挑选出对于报告基因具有组织特异性表达模式的胚胎，拍照记录后分类培养；F1长大后通过linker-mediatedPCR的方法鉴定对应于GFP（或RFP）表达图式的Tol2插入位点，并通过与已知基因组数据比较，对插入位点进行定位与分析；通过外交纯化得到转基因鱼，直至得到只含有单个插入品系的转基因鱼。辽宁斑马鱼实验