河南高活性/无非特异酶活PNGaseF去糖基化酶生物药物开发

在这里，Genovis分析了 C1 抑制剂——一种人血浆衍生的生物zhiliao药物，由 6 种 N-聚糖和多达 28 种 O-聚糖修饰，主要由唾液酸he心 1 结构组成。在不对这种高度异质的蛋白质进行任何预处理的情况下，反相LC-MS分析产生了无法详细解释的复杂质谱图。在天然条件下使用OmniGLYZOR Microspin色谱柱，可在3小时内有效去除所有O-聚糖。然而，蛋白质上仍残留着 1 到 3 个 N-聚糖。使用冻干的PNGase F和OmniGLYZOR试剂盒中包含的MS友好型RapiGest™ SF表面活性剂*，在变性条件下通过额外的去糖基化步骤去除这些不可接近的N-聚糖。观察到所有聚糖的完全去除，但分子上存在的少量he心 2 O-聚糖除外。水解O-聚糖的酶不会从变性中获益，这就是为什么OmniGLYZOR Microspin色谱柱只能在非变性条件下使用的原因。GalNAcEXO酶是可降低样品异质性，用于分析携带α连接的 GalNAc 残基作为未成熟截短he心 1 的复杂 O-糖蛋白。河南高活性/无非特异酶活PNGaseF去糖基化酶生物药物开发

Genovis 是一家瑞典生物技术公司，自2010年起，为生物制药公司提供SmartEnzymes 工具酶。Genovis提供一系列独特、快速且易于使用的酶学工具，主要用于生物制药行业和学术界。 我们在全球范围内提供创新的智能酶SmartEnzymes™，用于单克隆抗体、ADC、生物仿制药和双特异性生物药物的开发、生产和质量控制。您可以在我们的网站上“Application页面”获得更多应用信息，如果您有兴趣，可以和我们一起做一个“SmartStories”，也可以联系我们。 陕西PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis对游离的N-聚糖的分析表明，SialEXO在溶液中完全脱唾液酸化。

α连接的Genovis的GalNAcs的水解：GalNAcEXO 是一种 α-N-乙酰半乳糖胺苷酶，可有效水解糖蛋白上的末端 GalNAc 残基。与丝氨酸或苏氨酸连接的 GalNAc（称为 Tn 抗原）被 GalNAcEXO 快速有效地水解，并且该酶还在 α1-3 连接的末端 GalNAcs 上显示出活性。Genovis的GalNAcEXO 是一种外α-N-乙酰半乳糖胺酶，用于有效水解与糖蛋白（Tn 抗原）中的丝氨酸或苏氨酸残基相连的 α-N-乙酰半乳糖胺 （GalNAc）。该酶还在 α1-3 连接的末端 GalNAc 上显示活性。GalNAcEXO 在天然条件下水解糖蛋白上的 GalNAc，在 pH 值 6.0 至 7.6 范围内具有高度活性。

与PNGase F类似，Genvois的OmniGLYZOR 含有固定化酶的混合物，可快速有效地去除抗体、融合蛋白和其他糖基化蛋白上的 N 和简单的粘蛋白型 O-聚糖。聚糖的去除被用于减少异质性，以促进蛋白质的分析，例如质谱法。去糖基化也可用于研究聚糖的功能作用。N-和粘蛋白型O-连接聚糖的快速高效去糖基化；即用型离心柱形式 - 无酶干扰分析；与LC-MS兼容。与PNGase F类似，Genvois的与PNGase F类似，Genvois的OmniGLYZOR 含有去除 N-糖和最常见的粘蛋白型 O-糖所需的酶，即单唾液酸和二唾液酸he心 1 和 Tn 抗原 （α-GalNAc）。OmniGLYZOR Microspin 小柱中包含以下组分：PNGase F；O-糖苷酶。曲妥珠单抗Fc N-糖可以表征游离N-糖以及去糖基化抗体的功能和结构。

Genovis 集团由瑞典 Genovis AB 和美国全资子公司 Genovis Inc. 组成。该公司的在纳斯达克北方增长市场上市。如需了解更多信息，请访问投资者关系。 Genovis的经营理念是为生物制药和研究行业的客户提供工具，以促进和节省开发新治疗方法和诊断的时间。Genovis 酶产品，称为 SmartEnzymes，被世界各地的科学家使用，创新的产品形式促进了生物药物的开发和质量控制。 通过在2020年收购QED Bioscience，产品组合已扩大到包括用于研究、生物药物开发和诊断检测的抗体和试剂。在 网站 上阅读有关QED的更多信息 Genovis 研发活动的基石是客户关系，使产品开发能够满足客户需求。与专注于表征新酶、开发新工作流程和新靶点抗体的学术团体的合作同样有价值。固定形式可提高酶与底物的比率，快速去糖基化。重庆固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶生物药物开发

亲和纯化微离心柱，SialEXO 冻干 200 单位，OpeRATOR 冻干 200 单位。河南高活性/无非特异酶活PNGaseF去糖基化酶生物药物开发

为了研究 OglyZOR 对天然糖蛋白的活性，将该酶与依那西普、TNFR 和阿巴西普在 37°C 下有或没有 SialEXO 孵育 1 小时。当唾液酸被去除时，OglyZOR酶有效地水解了所有三种底物中的O-聚糖。Genovis的OglyZOR 酶可有效水解天然糖蛋白中的he心 1 二糖 （Gal-β1,3-GalNAc）。这使得这些酶适合在LC-MS分析之前制备样品，以鉴定其他PTM或确认氨基酸序列O-糖基化生物制药的全去糖基化：O-糖基化生物制药（如依那西普）很难表征。为了能够通过质谱法测定完整质量数，我们进行了酶促总去糖基化。N-聚糖被Genovis的PNGase F裂解，而O-聚糖可以与OglyZOR和SialEXO一起去除。。河南高活性/无非特异酶活PNGaseF去糖基化酶生物药物开发