河北N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶生物药物开发

GlycOCATCH®亲和纯化：用于粘蛋白型O-糖蛋白和肽亲和纯化的富集树脂。GlycOCATCH亲和纯化以方便的离心柱形式提供。该产品包含：4 个 GlycOCATCH 亲和纯化微离心柱，每个柱能够结合 50 μg 粘蛋白型 O-糖蛋白（总共 200 μg）。Genovis的SialEXO 冻干 200 单位，用于去除唾液酸；OpeRATOR 冻干 200 单位，用于结合的 O-糖蛋白的可选洗脱方法。1. 靶向 O-糖蛋白富集；2. 复杂样品的特异性净化；3. 用于改进 MS 分析的样品制备。O-糖基化蛋白和肽的特异性富集：O-连接聚糖参与多种生物过程，包括抑制病原体引起的gan染、炎症反应、造血和细胞信号传导。OglyZOR 是一种内切糖苷酶用于确认O-糖的存在和降低样品的异质性。河北N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶生物药物开发

G0F 抗体在 30 分钟内：半乳糖的存在会影响zhiliao性抗体引发的效应功能，为了研究抗体的作用方式，可能需要彻底去除半乳糖残留物。Genovis的GalactEXO Immobilized 的 β1-4 半乳糖苷酶活性在曲妥珠单抗上使用 30 分钟孵育证明。genovis的GalactEXO Immobilized 由强大的 GalactEXO 酶组成，该酶固定在琼脂糖珠上，并以易于使用的微离心柱形式格式化。GalactEXO是β-半乳糖苷酶的混合物，可有效去除N-和O-糖基化蛋白上的半乳糖残基。使用FabRICATOR®将抗体消化成亚基，并使用LC-MS进行分析。使用 GalactEXO 冻干和 GalactEXO 固定化都可以看到向 G0F 糖型的转变，但后者在z终制剂中没有留下酶。没有任何半乳糖基化结构表明半乳糖残基完全水解，因此LC-MS数据中任何剩余的次要峰都可以注释为亚基的糖化。没有任何半乳糖基化结构表明半乳糖残基完全水解，因此LC-MS数据中任何剩余的次要峰都可以注释为亚基的糖化。吉林瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶疾病机理研究SialEXO冻干由两种唾液酸酶组成，每种唾液酸酶都具有独特的活性，并且它们同时起作用。

当在完整状态下进行分析时，EPO的聚糖异质性导致了非常复杂的质谱图。通过在 37°C 下在 OmniGLYZOR Microspin 柱上孵育 1 小时，可以有效地去除 N 糖（含有PNGase F酶）和 O-糖，如对应于未修饰蛋白质的单个峰所示。EPO上残留了少量用乙酰化唾液酸修饰的O-聚糖，因为OmniGLYZOR对这种结构的水解效率低下。根据制造商Genvois的建议（在37°C下进行O/N孵育），两种底物蛋白也用另一种市售的去糖基化产物处理，并显示数据以供比较。另一方面，N-聚糖在内质网中翻译地连接到未折叠的蛋白质上。这导致某些 N-糖基化位点难以被 Genovis的PNGase F 接近，或者一旦底物蛋白折叠成其天然状态，就根本无法接近。因此，这种N-聚糖的水解需要底物蛋白以与酶活性相容的方式变性。

糖蛋白性能测试：O-聚糖的岩藻糖基化参与功能上重要的聚糖表位的合成，例如血型抗原和刘易斯结构。分析用这种复杂的聚糖结构修饰的糖蛋白可能具有挑战性，需要高效和特异性的酶工具。我们在许多糖基工程TNFR蛋白上测试了Genovis的FucosEXO，这些蛋白携带多达11个O-聚糖，这些O-聚糖以不同的键装饰。我们将该活性与其他市售岩藻苷酶进行了比较。FucosEXO 能够在 1 小时内对所有三种 TNFR 蛋白进行去岩藻糖磺酸处理，而用其他岩藻糖酶处理导致部分去除岩藻糖或根本没有去除。OmniGLYZOR 水解 N-和粘蛋白型 O-聚糖。

Genovis的PNGase F Automation 含有以自动化友好的 96 孔板形式冻干的 PNGase F 酶。它能够实现高通量 N-糖去除，从而简化一系列糖蛋白底物的下游分析。根据您的工作流程要求和样品可用性。PNGase F Automation 可在 96 孔板中冻干，用于 96 x 5 μg 或 96 x 50 μg 糖蛋白上的 N-糖自动水解。1. 实现自动化高通量样品处理；2. 可同时消解多达 96 个样品；3. 两种选择可用于不同样品量的消解;4. 即用型 - 只需添加您的样品即可。用于消化粘蛋白型O-糖蛋白和肽（包括唾液酸化O-聚糖）的冻干酶。Genovis的ImpaRATOR 冻干剂以冻干粉末的形式提供，装在 2000 单位小瓶中，用于消化 2 mg O-糖基化蛋白。1. 用于方法开发的灵活产品形式；2.以结合酶以提高效率；3. 适用于自动化工作流程；4. 即用型 - 只需加水即可！依那西普和曲妥珠单抗游离聚糖。四川冻干粉形式PNGaseF去糖基化酶疾病机理研究

OpeRATOR用于质谱法进行O-糖分析、O-糖肽图谱以及中级分析，消化发生在O-糖基化位点的N端。河北N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶生物药物开发

Genovis的PNGase F 是一种糖酰胺酶，可水解多肽天冬酰胺与所有哺乳动物天冬酰胺连接复合物、杂交体或高甘露糖寡糖的内层 GlcNAc 之间的酰胺键。 在反应过程中，从中去除聚糖的天冬酰胺残基被脱酰胺为天冬氨酸。释放的低聚糖完好无损，可用于进一步分析。N-糖的去除被用于MS分析的样品制备，以降低蛋白质的异质性，使游离的糖分析成为可能，并研究N-糖的功能作用。 该酶在大肠杆菌中表达，该重组基因来源于伊丽莎白金氏脑膜败血症。 评价抗体片段对完整蛋白聚集的影响。 IgG1 mAb1和mAb2在Biogen生产。 mAb1被糖基化，主要的糖型是具有0和1半乳糖的he心聚焦双触角聚糖(FA2和FA2G1); mAb2被糖基化。河北N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶生物药物开发