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做RIP的时候和beads孵育的lysate的浓度如何确定？有些动物的文献提到用细胞板数细胞个数，想知道如果用蛋白浓度的话，大概在什么数量范围的蛋白总量对应50ulBEADS?细胞实验外包。50ulbeads对应的是一个reaction，而我们推荐一个reaction是100ul裂解上清（2×107cells加入100ulRIPlysisbuffer得到），所以只需要在裂解前计数一下，并按括号中的比例加入裂解buffer，后续100ul裂解上清就是一个reaction的蛋白用量。不建议通过裂解后测蛋白浓度的方法进行配比。细胞实验外包的工作原理是什么？整体细胞实验外包实验室

实验二琼脂糖凝胶电泳和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳本实验主要介绍核酸和蛋白质分离与分析中比较常用的两种电泳技术—琼脂糖凝胶电泳和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。让学生了解两种电泳技术在分子生物学中的应用，理解如何利用凝胶电泳技术对DNA和蛋白质进行分离与分析，掌握两种电泳的基本原理和操作技术。细胞实验外包。2.1琼脂糖凝胶电泳凝胶的制备、样品准备与上样、电泳及电泳结果检测分析2.2SDS-聚丙烯酰胺凝胶不连续SDS-聚丙烯酰胺凝胶的制备、样品准备与上样、电泳及电泳结果检测分析2.3虚拟仿真琼脂糖凝胶电泳细胞实验外包重难点：凝胶类型与浓度的选择与电泳检测结果分析江西整体细胞实验外包细胞实验外包的发展对基础科学研究领域均有重要意义。

细胞实验外包实验中卫星菌落出现的原因是什么？该如何避免？（1）卫星菌落是氨苄降解后生长的杂菌。可能是感受态细胞的问题也可能是转化过程出现操作失误例如未在冰中进行转化，感受态在常温下放置过久失活，转化后摇菌时间过短，或者摇床速度过慢，没有把菌摇起来，如果不是转化过程出现的问题就要进一步考虑连接是否正确，连接时间12~16h，体系一般6ul-10ul，目的片段：载体一般1:3~1:10.（2）可以将培养时间控制在12h-16h之间，或者更换***为羧苄青霉素

RIP是研究体内蛋白与RNA互作的重要技术。该技术先用甲醛等试剂交联细胞内的“蛋白-RNA”互作复合物，裂解细胞后，用靶蛋白特异的抗体（或标签抗体）做免疫沉淀，获得“靶蛋白-RNA”互作复合物，去交联分离其中的RNA；RIP可以分提核浆的RNA-蛋白质复合物吗？南京英瀚斯生物科技有限公司，医学科研的增强子。一站式医学科研外包服务平台。专业为您承担细胞实验外包，数据真实无重复，报告内容详尽。欢迎来电垂询。理论上，可以采用能分别抽提核浆蛋白的蛋白抽提kit先分离样本，再进行RIP实验。但需要特别注意的是所用kit中的reagent不能有RNase和DNase，以及要能与下游的抗体beads孵育兼容。细胞实验外包有场地有设备有技术员的公司是：英瀚斯生物。

RIP实验南京英瀚斯生物科技有限公司，医学科研的增强子。一站式医学科研外包服务平台。专业为您承担细胞实验外包，数据真实无重复，报告内容详尽。欢迎来电垂询。RNA免疫沉淀将所关注的蛋白质的抗体(2-10µg)加入上清液中(6-10mg)，4℃轻柔搅动孵育2小时（至过夜）。2加入proteinA/G磁珠(40µL)，4℃轻柔搅动孵育1小时。根据所关注的蛋白质和抗体，加入的抗体量和孵育时间可能需要进行优化。如果一种抗体可以用于IP，则表明它可能也能用于RIP。细胞实验外包承接的标准是什么？四川细胞实验外包选择

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因为RIP做完得到的是RNA序列，要做后续检测，比如测序、判断目标序列位置等，是不是都必须要做RT-PCR，得到逆转录的DNA后，后面就跟ChIP相同了？细胞实验外包。常见的用realtimeqRT-PCR。如果对照的目的是保证两个样品间加入的细胞量一致或者进行定量，理论上说，使用input作为判别，计算不同样品上样量的差异。如果对照的目的是为了看IgG以及目的抗体富集的非特异性mRNA的量的话，那么可以找一个确定不会与目的抗体结合的RN**段设计primer进行qPCR，用来看IgG以及目的抗体拉下来的背景情况。RIP可以看成是普遍使用的染色质免疫沉淀ChIP技术的类似应用，但由于研究对象是RNA-蛋白复合物而不是DNA-蛋白复合物，RIP实验的优化条件与ChIP实验不太相同（如复合物不需要固定，RIP反应体系中的试剂和抗体相对不能含有RNA酶，抗体需经RIP实验验证等等）整体细胞实验外包实验室

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