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病理实验外包，南京英瀚斯可开展冰冻切片免疫荧光染色1.  冰冻切片室温晾干15 min，可用含10%正常山羊血清的PBS室温封闭切片1小时（此步可不洗）。2.  滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液（抗体的量视组织大小而定，原则是可以均匀覆盖组织面，且保证整个过程中不会使组织干涸）。3.  将切片放在加了PBS的免疫组化湿盒，室温孵育2小时或4℃过夜。4.  第二天先将湿盒放到37℃回温1 h，然后吸取片上的一抗进行回收，将切片插入到小染缸PBS冲洗。5.  滴加用PBS稀释好的二抗（避光）置于分子杂交箱中37℃孵育1小时。回收二抗，切片置于染缸内，PBS洗5 min×3次。6.  滴加DAPI工作液染核，室温10~20 min（工作浓度0.1%染色15 min）。7.  回收DAPI，滴加5-10 μl 抗荧光衰减封片剂或中性树胶，用处理干净的盖玻片封片，即可到荧光显微镜或者共聚焦显微镜下观察拍照。8.  做好的片放在切片盒内，置于4℃冰箱，可保存一周左右。病理实验外包关键知识，你必须知道的那些事，南京英瀚斯生物。河南专业的病理实验外包哪家好

病理实验外包，病理染色组织脱水注意事项：1.脱水必须在有盖的玻璃品中进行，防止吸收空气中的水分。2.在更换高一级的脱水剂时，比较好不要移动材料以免损坏，可用吸管吸出器皿中的脱水剂，再用吸水吸尽器皿内剩余液，然后于皿中加入高一级脱水剂。3.在低浓度酒精中，每级停留不宜太长，否则易使组织变软，助长材料的解体。4.在高浓度或纯酒精中，每级停留的时间也不宜太长，否则会使组织变脆，影响切片。5.如需过夜，应停留在70%酒精中。6.脱水必须彻底，否则不易透明，甚至使透明剂内出现白色混浊现象贵州病理实验外包检测病理实验外包，医学实验外包检测实验平台，认准南京英瀚斯。

病理实验外包，病理染色HE染色常见问题：Q1：HE染色比较常见的红蓝失调答：（1）偏蓝色：苏木素染色过深，分化不够；伊红试剂过期；伊红染色时间太短，分化过度。（2）偏红色：苏木素染色过浅，分化过度；组织固定不佳，细胞核不着色；脱蜡不彻底，苏木素染不上；苏木素氧化成熟不够；伊红染色过深，分化不足。Q2：HE染色后出现的大白色斑块或斑点答：脱蜡前烤片温度偏低，时间过短，蜡未完全融化；切片在脱蜡溶剂中停留时间过短；脱蜡溶剂使用太久，得更新。

1.取材与固定固定剂同时具有硬化细胞组织的作用，使制片便于进行。2.洗涤与脱水洗涤是把深入组织中的固定剂洗去，防止染色中的结晶产生，驱除组织中的水分，利于透明和浸蜡。3.透明与浸蜡(透蜡)脱水后的组织中水分已被透明剂所代替，而有利于浸蜡。浸蜡的目的是使组织有一定的硬度而有利于切片和细胞组织保持一定的生活时状态。4.包埋与切片用石蜡和其他包埋剂(组织填充剂作包埋剂)包绕一定的形状以便于切片。将包埋好的组织块用切片机切成一定的厚度(厚度以um计)。5.贴片(展片、捞片)和染色将已且妥的切片在温水中展平整后用载玻片贴上，稍晾干后再烤片。染色可使细胞和组织被染上不同的颜色而产生一定的折射率，便于显微镜观察。6.切片染色后用胶类物质将其封固，便于长期保存。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包研究整体解决方案_英瀚斯生物。

病理实验外包，染色常见染色介绍天狼星红染色：主要由天狼星红染色液、Mayer苏木素染色液组成，主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中，在普通光学显微镜下心脏血管等组织的胶原纤维被染成红色，在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助作用。采用免疫组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维，但所用抗体昂贵，操作费时，而采用天狼星红染色试剂便宜，操作简单。天狼星红染色液操作步骤1、组织固定于10%福尔马林固定液，常规脱水包埋。2、切片厚6μm，常规脱蜡至水。3、天狼星红染色液滴染1h。4、流水稍冲洗，去除切片表面染液。5、Mayer苏木素染色液染细胞核8～10min。6、流水冲洗10min。7、常规脱水透明，中性树胶封固。天狼星红染色可用作肝纤维化以及肾纤维化模型的定性与胶原纤维沉积的半定量分析。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。南京病理实验外包检测公司，科研课题解决方案。贵州病理实验外包检测

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病理实验外包，病理染色HE染色常见问题：Q3：细胞核染色过浅，颜色暗淡答：切片在苏木素染液中停留过短，或苏木素过度氧化失效，或分化时间太长。对策：重新染色。将组织切片放入0.01%氢氧化钠、0.5%氨水、饱和的碳酸氢钠溶液、乙醇溶液，每个3-5min即可，接着重新染色。可以适当地组织的嗜碱性以增强核染色，如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中3h，自来水冲洗5-10min染色，或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中1h，自来水冲洗10min染色。Q4：细胞核染色过深，胞浆着蓝色答：切片在苏木素染液中停留过长；或切片太厚；或分化时间太短。这种情况首先镜下看看切片厚度(比较好厚度1-2层细胞核)，要么重新染色，要么重新制片。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。河南专业的病理实验外包哪家好