海南模型医学实验外包报告

医学实验外包，分子机制研究，我们选好明星分子以后，调控层次就是要考虑的问题了，这里说的调控层次就是围绕中心法则展开对明星分子本身的探索，我们知道中心法则涉及到DNA-RNA-蛋白三个层面，根据调控的层次一般我们又分为转录水平和转录后水平，转录我们知道是发生在细胞核里面的。所以我们看到某个分子定位在细胞核时我们一般就从转录水平进行考虑，比如转录因子对DNA序列的结合，DNA甲基化、组蛋白修饰等等，而当RNA被转录出来后要经过加工过程，比如可变剪接，miRNA介导的降解，mRNA翻译成蛋白，蛋白合成后会被磷酸化修饰或者泛素化修饰从而***或者降解等等，这些是转录后的水平。那么我们在确定明星分子后，一般来说需要首先确定的是变化发生在哪个层面，是RNA还是蛋白，是蛋白的产生（翻译）、降解（比如泛素化）还是活化（比如磷酸化），从而把研究的焦点集中到明星分子的某个过程，这个层面是围绕一个明星分子的前世今生来展开的。医学实验外包，造模经验丰富，操作熟练。海南模型医学实验外包报告

医学实验外包之ChIP染色质免疫共沉淀实验， 染色质免疫沉淀的DNA适用于多种分析方法。如果目的蛋白的靶序列是已知的或与染色质免疫沉淀的DNA杂交，来验证目的蛋白与DNA靶序列的特需要验证的，可采用狭缝杂交(Slot blot)的方法，把靶序列特异性探针异性结合。还可以根据靶序列设计引物，用半定量PCR的方法进行测定，或采用Real-time PCR方法进行定量分析。如果目的蛋白的靶序列是未知的或高通量的(high-throughput)，可采用Southern杂交。但因为免疫沉淀的DNA量较少，所以在研究时通常要用PCR方法扩增DNA探针，再进行整个基因组扫描。还可以把沉淀的DNA克隆到载体中，进行测序，寻找该序列附近的开放阅读框，发现新的基因调节序列。重庆医学医学实验外包报告医学实验外包一站式生物医学实验外包平台。

医学实验外包，Co-IP检测介绍。免疫共沉淀(Co- Immunoprecipitation, Co-IP)是利用抗原和抗体的特异性结合以及细菌的Protein A或G特异性地结合到免疫球蛋白的Fc片段的现象开发出来的方法。其基本原理是,在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体,孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Agarose珠上的Protein A或G,若细胞中有与兴趣蛋白结合的目的蛋白,就可以形成这样一种复合物:“兴趣蛋白—抗性蛋白抗体—Protein A或G—Agarose珠”,经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,复合物又被分开。然后经免疫印迹或质谱检测目的蛋白。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内与兴趣蛋白天然结合的,符合体内实际情况,得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。

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