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问题 可能的原因 处理方法
印迹上出现条纹 在凝胶的蛋白负荷过量。 准确测量蛋白浓度，载入较少的蛋白。
印迹有污染或模糊 凝胶平衡不当，或在实验过程中收缩 检查凝胶平衡时间。
采用丽春红S染色时， 转膜无效 转膜时，小心除去气泡。
印迹染色较差 确保在电转过程中因为温度过高而产生气泡或凝胶/膜变形
采用丽春红S染色时， 在转膜过程中蛋白没有转移 检查设备（转膜盒、盒盖、电源）。
印迹没有染色 检查在转膜过程中凝胶和膜的顺序是 确保膜位于凝胶的右侧。
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除非您正在研究组蛋白和组蛋白修饰，否则您应采用X-ChIP方案，以使您的靶蛋白与DNA的连接稳定。增加交联时间。 蛋白G磁珠能结合更大范践的执体，包括小鼠单克境抗体，为达到抗体选择的比较大灵活性，我们推荐使用蛋白A/G混合物（目录号16-663）。检测PCR引物的效果。加入相应的时维物，必要时重新设计引物。
关于ChIP中关键步骤的详细讨论及实验问题解答，请参考默克密理博染色质免疫沉淀指南（ChIP实验指南）。
酶联免疫吸附实验（ELISA） 宝山区组蛋白抗体抗体咨询报价上海益启生物的抗体询价联系方式。
对每种细胞类型或组织焚型单壮优化表解，使用l化试管或低吸附试管。确保所有试剂都是新鲜配制的，且没有污染物。增加洗涤次数。运行一次"无DNA"PCR反应，以确定您的样品是否被核酸污染。
使用PCR的专用移液管;在设置PCR之前，使用紫外性照射移液管。采用专用移液管，在三个不同的房间/区域进行ChIP、DNA纯化和PCR反应设置，或在遇风期内设置反应。 避免使用票装水或其它形式的预包装水。使用从含有紫外光源的Mll-QR系统中制造的水。使用防雾移液管吸头。
使用该分析法时的"夹心"产生过程∶
将一种纯化的、靶标特异性抗体（捕获"抗体）结合在因定相上一通常阔着在平板孔约底叔加入样品（可能含有未知量的抗原），使其与捕获抗体发生结合反应。通过洗涤除去未结合的样品。
加入一种标记抗体（检测抗体），使其与抗原结合。在双抗夹心ELISA中，捕获抗体和检测抗体的选择十分重要，直接关系到实验结果的准确性、特异性和灵敏度。
夹心法ELISA和竞争性ELISA之间的差别
Troubleshooting
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在将进行ChIP咳PCR实验的地点期近，不得打开含有扩增PCR产物约试幢。
确保您使用的抗体是在ChIP中给证过的抗体。关于ChIP抗体约完整选择过程，请参见默克官网表观遗传学。如果您正使用ChIP抗体，请增加抗体的解育时间。 一般1-10uq ChIP抗体是足够的。但是，所需抗体量可能取决于您的靶轮蛋白相对丰度和抗体与靶标的亲和力。 在交联前，单独准备一个平板，用于测定细胞数。重新评价每个反应的细您数。增加您的细晚数，特别是在尝试检测较任丰度的靶蛋白时。 上海益启生物抗体订购方便。上海Upstate抗体抗体咨询报价
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免疫沉淀(又叫免疫沉淀(IP))
免疫沉淀是很有价值的研究工具，目的是研究某一特定蛋白的关键信息，包括：小规模蛋白纯化用于功能研究，N-端序列分析，蛋白-蛋白相互作用的研究，细胞或组织中蛋白相对丰度和分布的测定。免疫沉淀分析法的成功取决于两个主要因素：原始样品中抗原的丰度和抗体对该抗原的亲和力(一般需要108 M-1或以上的亲和力)。在开始免疫沉淀之前，确保特定的步骤有适当的实验对照。对照抗体在性质上尽可能与该特异性抗体类似。 黄浦区Sigma抗体抗体订购