杨浦区Calbiochem抗体抗体哪家优惠

时间:2021年01月28日 来源:

问题                     可能的原因                         处理方法

印迹上出现条纹     在凝胶的蛋白负荷过量。       准确测量蛋白浓度,载入较少的蛋白。

印迹有污染或模糊   凝胶平衡不当,或在实验过程中收缩 检查凝胶平衡时间。

采用丽春红S染色时,     转膜无效                转膜时,小心除去气泡。                                              

印迹染色较差                                   确保在电转过程中因为温度过高而产生气泡或凝胶/膜变形      

采用丽春红S染色时,  在转膜过程中蛋白没有转移      检查设备(转膜盒、盒盖、电源)。

印迹没有染色          检查在转膜过程中凝胶和膜的顺序是   确保膜位于凝胶的右侧。

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经ChIP验证的抗体洗涤、洗脱和交联逆转

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Magna ChIP™ HiSens Kits

Magna ChIP™ HiSens kit采用统一的缓冲液体系,兼容更***的样本起始量,获得更好的信噪

比,以实现超灵敏检测。

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非特异性条带    抗体(一抗或二抗)浓度过高                  降低抗体浓度。

SDS可能引起对固定蛋白条带的非特            转膜后,振荡洗涤

异性结合                                在操作过程中不使用SDS。


条带扩散        抗体(一抗或二抗)浓度过高           降低抗体浓度。

               在凝胶上载入过多蛋白                 减少蛋白上样量。


黑色印迹,白色条带,   抗体(一抗或二抗)浓度过高    减少抗体浓度,特别是HRP偶联的二抗。    

或信号快速减少      

免疫沉淀

采用抗体-抗原沉淀(又叫免疫沉淀(IP))的方法将特异性蛋白从细胞或组织裂解液中分离出来。

注意

当从体内组织或体外培养条件下取出细胞时,膜受体或其它表面抗原会自然的发生内化。为尽量减少这种情况,未固定细胞必须在冰和/球4℃下保存。

采用T10B9—抗Mi-Mark" 抗CD3-PE就体(黄色柱状圈,产品货号FCMAB168P)对人外周血单模细胞(P州C)进行染色。未染色的PBMC显示为灰色柱状圈。采用Guava easyCyte"8HT流式细脆分析仪进行细胞分析。

注意

未固定细胞比较脆弱,破坏它们不需要太高的条件。为保证未固定细胞存活并在流式细胞分析仪上进行数据获取,重要的是采用轻柔的、快速的和高效的步骤。

技术亮点

Amnis成像流式细胞分析仪

显微镜检测法+流式细胞术

Amnis"成像流式细脆分析仪是细脆分析中的佼佼者,可提供每个个体细胞亚群和难于获得的细胞亚群的深度分析和详细成像。从免疫学至药物发现乃至寄生虫学,对细胞-细胞相互作用研究、形态学分析、DNA损伤和修复,乃至更多方面而言,我们的成像流式细胞分析仪可获得富有洞察力的数振。我们目前提供两种仪器平台-ImageStream⑧X和FlowSight@成像流式细胞分析仪-以符合您的研究需求和预算。 益启生物是Sigma抗体的代理商。

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在保存抗体时请注意以下几点:

为保持比较大反应性,应按照厂家说明书保存试剂(如,当指定保存温度为2-8℃时,应避免将抗体置于室温下)。保存抗体的经验法则是将其置于非无霜冰箱/制冷机内的严格密封容器中,远离组织固定剂和交联试剂。除非加入稳定蛋白,如BSA(1% w/v),否则抗体不得

在工作液中长期保存。避免长期保存稀释的抗体。保存时遇到的主要问题是细菌或***污染。

如果抗体保存在2-8℃超过2-3天,建议进行过滤除菌和/或加入抑菌剂/防腐剂,如0.05%叠氮化钠或0.1%硫柳汞。 Merck抗体的报价具体是多少呢?静安区WB抗体抗体销售

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无信号                在检测之前,转印膜在贮藏过程中发    

生蛋白降解

二抗选择错误

曝光时间太短

抗原上样量不足

抗原可能被破坏

检测系统

                     一抗的亲和力较低

化学发光底物已丧失活性。

已从膜上剥离抗体并再次杂交。

处理方法            使用新转的膜进行实验。

检查是否使用适当的二抗。

增加曝光时间。

在凝胶上载入更多的抗原,或在载入之前使用超滤管浓缩样品,

或使用免疫沉淀,以增加凝胶中的目标蛋白量。

检查确保电泳处理未破坏抗原性。

增加(和优化)一抗的浓度和培养时间、温度。 杨浦区Calbiochem抗体抗体哪家优惠

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