南京在体实时光纤成像原理

在体光纤成像记录的目的是实时检测细胞的活性变化。基于钙离子浓度变化的荧光成像技术被较多用来记录神经元活性。在体光纤记录方法与传统的在体电生理记录方法有着不同的特点，光纤记录因其稳定、方便、易上手而应用较多。首先，将荧光蛋白表达在特定类型的神经元中，光纤记录可以实现细胞类型特异性的活性检测，而用电生理记录的方法记录特定类型的神经元的活性比较困难。其次，电生理记录容易受到环境中的电信号以及动物的行为动作影响，而光纤记录相对来说有着较强的抗干扰性能。然后，光纤记录相对稳定，可以很容易实现长时程的活性检测，例如动物的整个学习过程，而利用电生理记录实现起来则相对困难。较后，光纤记录用神经元群体的荧光强度变化来表征神经元整体的活性变化，不能反映单个神经元的活性，而电生理记录则能够检测到单个神经元的活性，具有更高的空间分辨率。在体光纤成像记录提供含有光子强度标尺的成像图片。南京在体实时光纤成像原理

小动物在体光纤成像记录可根据实验需要通过尾静脉注射、皮下移植、原位移植等方法接种已标记的细胞或组织。在建模时应认真考虑实验目的和选择荧光标记，如标记荧光波长短，则穿透效率不高，建模时不宜接种深部脏器和观察体内转移，但可以观察皮下瘤和解剖后脏器直接成像。深部脏器和体内转移的观察大多选用荧光素酶标记。小鼠经过常规麻醉（气麻、针麻皆可）后放入成像暗箱平台，软件控制平台的升降到一个合适的视野，自动开启照明灯（明场）拍摄首先一次背景图。下一步，自动关闭照明灯，在没有外界光源的条件下（暗场）拍摄由小鼠体内发出的特异光子。明场与暗场的背景图叠加后可以直观的显示动物体内特异光子的部位和强度，完成成像操作。值得注意的是荧光成像应选择合适的激发和发射滤片，生物发光则需要成像前体内注射底物激发发光。苏州在体实时监测神经元活动记录技术在体光纤成像记录调整光源，波长，滤光片，相机。

在体光纤成像记录的应用，揭示机体的生理病理改变过程，目前, 在体生物光学成像技术己成功应用于 干细胞移植、 坏掉的免疫、 毒血症、 风湿性关节炎、 皮炎等发病机制的研究中, 可以实时监测生物机体的生理、病理改变过程, 具有重要的临床意义。药物的筛选和评价的应用目前 , 转基因动物模型己大量应用于病理研究、药物研发、 药物筛选和药物评价等领域。通过体外基因转染或直接注射等手段, 将荧光素酶或绿色荧光蛋 自等报告基因标记在生物体内的任何细胞， 如：坏掉的细胞、 造血细胞等上, 采用在体生物光学成像技术对其示踪, 了解细胞在生物体内的转移规律,不单能够检测转基因动物体 内的基因表达或 内源性基因的活性和功能, 而且能够对药物筛选及疗效进行评价。

在体光纤成像记录在自由活动动物的深部脑区实现光信号记录和神经细胞活性调控；高质量，亚细胞分辨率的成像；多波长成像，实现较多的钙离子成像（GCaMP or RCaMP），和光遗传实验，特定目标光刺激；在体光纤成像系统是模块化设计，使用者拥有很高的灵活性，可以随时根据研究需要对系统进行调整，比如调整光源，波长，滤光片，相机等。在深部脑区选定的特定神经细胞或部分获得连续的实验数据流，然后对单细胞提取密度轨迹。钙离子成像轨迹也可以被同步，与其他行为学实验（摄像拍摄，奖励设备等）同步时间标记。在体光纤成像记录其他行为学实验（摄像拍摄，奖励设备等）同步时间标记。

在体光纤成像记录荧光素酶的每个催化反应只产生一个光 子 , 通常肉眼无法直接观察到, 而且光子在强散射性的生物组织中传输时, 将会发生吸收、 散射、 反射、 透射等大量光学行为 。 因此，必须采用高 灵敏度的光学检测仪器（ 如CCD camera）采集并定量检测生物体内所发射的光子数量, 然后将其转换成图像， 在体生物发光成像中的发光光谱范围通常为可见光到 近红外光波段, 哺乳动物体内血红蛋白主要吸收可见光, 水和脂质主要吸收红外线, 但对波长为 590~1500nm的红光至近红外线吸收能力则较差， 因此, 大部分波长超过600nm的红光, 经过散射、吸收后能够穿透哺乳动物组织, 被生物体外的高灵敏光学检测仪器探测到, 这是在体生物发光成像的理论基础。在体光纤成像记录利用生物发光技术进行动物体内检测。神经生物学成像光纤方案

在体光纤成像记录探测从小动物体内系统。南京在体实时光纤成像原理

在体光纤成像记录的应用作为一项新兴的分子、 基因表达 的分析 检测技术, 在体生物光学成像已成功应用于生命科学、 生物医学、 分子生物学和药物研发等领域, 取得了大量研究成果, 主要包括：在体监测坏掉的的生长和转移、 基因疗于中的基因表达、 机体的生理病理改变过程 以及进行药物的筛选和评价等，利用在体生物光学成像技术, 通过荧光素酶或绿色荧光蛋白标记坏掉的细胞, 可以 实时监测被标记坏掉的细胞在生物体内生长、转移、 对药物的反应等生理和 病理活动, 揭示坏掉的发生的发展的细胞和分子机制。南京在体实时光纤成像原理