奉贤区阿尔兹海默症疾病动物模型建模

动物模型名称：高脂饲料致高脂血症大鼠模型2、实验动物种属：SD大鼠3、实验动物性别：雄性4、实验动物年龄：成年5、实验动物体重：180~220g1、实验方法：大鼠给予高脂饲料喂养20天。分别于造模前和造模20天，测定血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量2、检测标准：造模20天后模型组大鼠血清TC、TG、HDLC、LDLC均增加，与对照组比较具统计学差异。1.提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据图片。2.根据要求提供构建成功的模型动物或相关组织材料.开展小鼠疾病模型初步研究分析小鼠疾病模型研究初步结果与生物学信息资料等相关知识间的差距！奉贤区阿尔兹海默症疾病动物模型建模

呼吸系统疾病动物模型（animalmodelofrespiratorydiseases）1、肺炎动物模型：通过在主支气管注入活菌液。2、肺气肿模型：给动物气管内或静脉内注入一定量木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、致热溶解酶、败血酶以及由脓性痰和白细胞分离出来的蛋白酶等，可复制成实验性肺气肿。以木瓜蛋白酶形成的实验性肺气肿病变明显而且典型。3、肺水肿模型：用氧化氮吸入可造成大鼠和小鼠中毒性肺水肿，或用气管内注入50％葡萄糖液引起渗透性肺水肿。4、肺纤维化模型：气管内注入博来霉素是目前常用复制肺纤维化动物模型方法。奉贤区阿尔兹海默症疾病动物模型建模避免了在人身上进行实验所带来的风险。

pirb的功能和下游抑制性信号通路仍然未被阐明，因此迫切需要pirb的细胞和动物模型。目前对于pirb基因功能的研究，多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide，pep)和抑制剂，或者采用慢病毒转染。前者受到是否能够透过血脑屏障和抑制剂效率的影响，后者慢病毒转染在原代细胞和在体的转染效率比较低，使研究pirb的功能受到极大的限制。为解决这些问题，我们通过crispr/cas9技术建立了pirb基因敲入小鼠，将pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位点，为研究pirb在免疫系统或者神经系统的作用和机制提供了很好的工具。技术实现要素：本发明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠动物模型。

pcrmix：反应条件：pcr扩增产物的电泳鉴定结果如图3所示，从图3中可以看出，6、8、9号为pirb基因敲入小鼠在、，wt小鼠pcr产物没有这两个扩增产物。(c)短链pcr反应，引物如下：primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能够扩增出344bp的产物，而野生型没有。pcr体系：反应条件：(2)f1代小鼠测序：通过pcr扩增后测序鉴定小鼠基因型，如图4所示，为6号pirb基因敲入小鼠测序峰图，pcr所用引物如下：sequencingprimerforpcrproduct1：5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern杂交检测f1代小鼠基因型：采用bamhi和avrii核酸内切酶切割dna分子，切割示意图如图5。具体的southern杂交检测过程如下：步骤a、提取f1代小鼠尾部dna；步骤b、制备探针，通过pcr方法将dig-dutp渗入到步骤a的dna分子中。通过小鼠疾病模型的构建有助于我们深入揭示潜在致病基因作用机制。

    代谢组学的研究对象大都是相对分子量在1000以内的小分子物质，因此常用的血液样本在取样后，应小心操作，防止溶血，尽快分离出血清，分置于温环境下保存。由于用于病理实验的动物组织采集相对其他样品的采集，操作更繁琐，在处理过程中许多细节容易忽略，造成数据不完美（甚至不能用）。因此接下来将重点介绍组织样品采集的注意事项及其固定。组织样品采集注意事项组织应新鲜，操作时间尽可能短，否则细胞发生死后变化、自融及现象。是动物心脏还在跳动时采集，样本取出后在5分钟以内置于固定液内，避免长时间暴露在空气环境中。组织块尽量小而薄。组织块的厚度以不超过5mm为宜，较为理想的厚度为2mm左右，主要目的是使固定液迅速而均匀的渗入组织块内部。勿使组织块受挤压。在采集过程中，应尽量选择较为锋利的手术器械，如手术刀片等，避免操作过程中挤压挫伤标本。挤压过的组织均不可用。固定液的量一般以组织块大小的20倍为宜，组织能够在容器内自由移动。尽量保持组织的原有形态。新鲜组织经固定后，或多或少产生收缩现象（如胃肠），为此可将组织展平，以尽可能维持原形。保持组织清洁。组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用生理盐水冲洗。疾病动物模型建模好做吗？奉贤区阿尔兹海默症疾病动物模型建模

必须真正了解研究者感兴趣且需要的小鼠疾病模型。奉贤区阿尔兹海默症疾病动物模型建模

诱导模型实验动物：小鼠、豚鼠、大鼠造模试剂：烟雾、空气污染物及有害气体（PM2.5、臭氧、二氧化氮）、脂多糖、弹性蛋白酶获得方式：动物全身长时间放置在密闭容器内，暴露于烟雾、空气污染物或者有害气体；气管内滴注脂多糖或者弹性蛋白酶。模型特点：烟雾、空气污染物或者有害气体诱导模型使用的物质、暴露的剂量、频次和时间不尽相同；脂多糖造模时间短，可用来模拟急性加重反应，但不能反应慢性病变的过程，通常需要和其他造模方法联用。2.基因模型实验动物：α1-抗胰蛋白酶等基因敲除小鼠获得方式：直接购买模型特点：α1-抗胰蛋白酶基因敲除小鼠是经典的COPD转基因模型，更准确地理解易感基因的致病机制。奉贤区阿尔兹海默症疾病动物模型建模