天津品牌EdU细胞增殖检测试剂盒评价

时间:2024年01月30日 来源:

传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性,抗原修复,抗原抗体过夜孵育,操作步骤复杂繁琐。并且由于BrdU抗体分子较大,嵌入DNA分子中的BrdU无法直接与BrdU抗体结合,必须先进行DNA变性操作才能使BrdU抗原表位暴露,但变性的程度可能导致错误结果。如果变性不充分,会导致BrdU难以暴露,无法检测,而且变性过程从边缘向中间渗透,会导致细胞核DNA的变性不均匀,边缘模糊不清。如果变性过分,则会导致DNA断裂,甚至降解,导致核染不均一。另外,不同抗体试剂公司的抗体质量不一致,造成难以确保实验重复性,且容易产生假阳性结果。EdU细胞增殖检测试剂盒如何发挥重要作用?天津品牌EdU细胞增殖检测试剂盒评价

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    注:1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态;2)孵育时间至少2小时,可延长至24小时后再检测也可以。4、以1×PBS清洗细胞两次,每次5分钟,以除去未掺入RNA的EU残留。注:贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。细胞的固定和通透1、每孔加入150μl细胞固定液,室温培养30分钟,弃固定液;注:1)该试剂盒配备了细胞固定液,也可以使用含4%多聚甲醛的PBS来进行细胞固定;2)如果使用其他的细胞固定剂建议用DEPC水来配置,避免RNA酶降解细胞内的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸,摇床孵育5分钟;3、弃甘氨酸溶液,每孔加入300μlPBS洗液,室温清洗5分钟;4、每孔加入300μlTritonX-100细胞通透液,室温通透10分钟,弃细胞通透溶液;5、每孔加入300μlPBS洗液,室温清洗5分钟;EU染色1、通过用10:1去离子水稀释10×反应缓冲液进行配制1×EU反应缓冲液;2、按照溶解200mg缓冲添加剂溶于1ml去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解,即为可用的缓冲添加剂的浓度,建议现用现配;注:缓冲添加剂为白色粉末,较难准确称量,称量范围可稍微放宽,但是不应超过±20%,且该粉末较易氧化,使用后请旋紧管盖,如试剂出现棕黄色,则需报废或更换。湖南如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒供应商EdU细胞增殖检测试剂盒如何发挥重要作用?上海东寰告诉您。

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EdU细胞增殖检测和BrdU细胞增殖检测的对比。小分子化合物AndyFluor™azide与EdU之间的点击化学(ClickChemistry)反应不需要DNA变性,就可以进行高效快速的细胞增殖检测分析,该反应不受双链DNA中碱基对的影响,因此客户了BrdU掺入法的弊端。图2.使用EdU细胞增殖检测试剂盒对细胞和组织的染色效果。使用10μMEdU处理A549细胞2小时,然后分别使用AndyFluor™488azide(绿色,上图)、AndyFluor™594azide(红色,中间图)检测细胞增殖活性,使用DAPI进行复染(蓝色)。腹腔注射EdU到小鼠体内(每公斤小鼠注射5mgEdU),分别于0、12、24小时之后取小鼠肠组织,制成切片用AndyFluor™488azide(绿色,**下图)检测细胞的增殖情况,使用DAPI进行复染(蓝色)。

EdU检测法中的点击反应(Clickreaction)原理图。生物素或荧光探针等标记的叠氮化物(LabeledAzide)与掺入到细胞DNA中的EdU,在铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,终使细胞DNA标记上生物素等探针。本试剂盒反应简单、检测灵敏度高。本试剂盒基于简单高效的点击反应,无需DNA变性,只需少量的小分子叠氮化物探针即可非常有效地标记出掺入的EdU,并且可以检测到单个细胞的增殖情况。本试剂盒使用便捷、兼容性好。通过点击反应,新合成的DNA会被相应的生物素探针所标记,从而可以使用适当的检测设备检测到增殖的细胞。EdU细胞增殖检测试剂盒的发展趋势如何?

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EdU细胞增殖检测:EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与Apollo荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性,适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究,尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。与BrdU检测方法相比,EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU染料只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免样品损伤,而且无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更准确地反映DNA复制活性。上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒的应用范围。湖南哪家公司提供EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好

使用EdU细胞增殖检测试剂盒能给人们带来便利吗?天津品牌EdU细胞增殖检测试剂盒评价

EdU细胞增殖方法简单,方便,无需DNA变性,能够与各种抗体或荧光蛋白同时标记,以检测细胞其他性状特征。为了与其他荧光共同使用,东寰生物提供多种染料供选择,覆盖常用检测通道,方便您轻松选择适合的染料,比较大限度地扩展第三方染色的适用范围,比较大限度地满足您的检测仪器要求,完全解决您的实验难题。EdU细胞增殖检测方法不需要剧烈的DNA变性操作,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,更适合结合其他染料或蛋白标记(如P65抗体)等进行多重标记,从而在细胞水平获取更多的直观多维特征信息,更适合深入开展细胞功能方面的研究天津品牌EdU细胞增殖检测试剂盒评价

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