河北提供EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好

EdU-488细胞增殖检测试剂盒(MeilunEdUCellProliferationKitwithAlexaFluor488)，是一种利用核苷渗入法对细胞增殖情况进行快速、简单、高灵敏检测的试剂盒。其原理为：试剂盒中的EdU(5-ethynyl-2′-deoxyuridine)是一种胸苷(T)类似物，EdU可以在在细胞周期的S期中替代胸苷掺入到新合成的DNA中；另一方面，EdU上的乙炔基能与叠氮化物(如荧光探针AlexaFluor488Azide)通过Cu+的催化发生共价反应，形成稳定的三唑环，该反应非常迅速，被称作点击反应(Clickreaction)(图1)。通过点击反应，新合成的DNA会被绿色荧光标记，然后通过检测荧光信号实现细胞增殖的检测。EdU细胞增殖检测试剂盒常见的用途有哪些？上海东寰告诉您。河北提供EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好

EdU细胞增殖检测方法不需要剧烈的DNA变性操作，只需温和的细胞固定化和透化处理，能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点，更适合结合其他染料或蛋白标记（如P65抗体）等进行多重标记，从而在细胞水平获取更多的直观多维特征信息，更适合深入开展细胞功能方面的研究。该方法无需DNA变性，无需抗原修复，无需抗原抗体反应，简单、灵敏、快速、准确，适合各种细胞系的细胞增殖检测，尤其适用于各种细胞系的高通量筛选实验，如在药物筛选中检测加药后细胞增殖变化。山东哪家公司提供EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒的运用方式。

上海东寰生物科技有限公司即核苷渗入法。以前常用的核苷渗入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸类似物)法，但BrdU法的缺点是需要变性DNA后才能与抗体结合，导致了DNA双链结构的破坏，影响了其他染料的结合染色，导致染色弥散，准确性降低等问题。EdU法作为新型的核苷渗入法具有以下优点：安全—–不使用[3H]thymidine，无放射性污染。简单—–基于小分子化学反应的检测方法，简单高效，需三步：EdU孵育；细胞固定；荧光检测。无需DNA变性和孵育抗体。

BrdU法和BeyoClick™EdU法检测原理的比较。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗体，由于空间位阻，双链DNA须变性后才能使BrdU抗体与BrdU结合。法使用小分子标记的叠氮化物(Azide)，无需DNA变性，操作更便捷，兼容性好，检测结果更加稳定可靠。本试剂盒检测快速。相对于BrdU法，本试剂盒采用BeyoClick™EdU法检测新合成的DNA，所需时间缩短。经本试剂盒处理后，增殖的细胞呈棕色，可以用普通光学显微镜进行观察。HeLa细胞用本试剂盒检测细胞增殖的效果参见图3。图3.HeLa细胞用本试剂盒检测细胞增殖的效果图。无EdU组观察不到棕色染色(左侧一列)；EdU(10μM)孵育2小时组有明显的棕色染色(中间一列)；而用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)提前预处理0.5小时后，棕色染色减弱，说明DNA合成被抑制后，EdU的掺入被抑制(右侧一列)。EdU细胞增殖检测试剂盒运用再哪些领域？

    摇床孵育5分钟，以中和过量的多聚甲醛；(c)弃甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室温清洗5分钟；(d)每孔加入300ulTritonX-100细胞通透液，室温通透10分钟，弃细胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室温清洗5分钟；染色反应液组分500ul1ml2ml5mlIX反应缓冲液430ul860ulmlml催化剂溶液20ul40ul80ul200ulTAMRA红色荧光溶液ulul5ulul缓冲添加剂50ul100ul200ul500ul(d)每孔加入100ul配置好的检测混合液，以覆盖细胞为宜，避光、室温孵育30分钟。(e)弃染色反应液，加入300ulTritonX-100细胞渗透液清洗2-3次，每次10分钟；(f)弃细胞渗透液，用PBS洗两次，每次5分钟。DNA染色(a)将Hoechst33342用PBS溶液1:1000进行稀释得到终浓度为5ug/ml的lxHoechst染色液；(b)每孔加入300ul1xHoechst染色液，室温避光孵育20-30分钟后，弃染色液；(c)每孔加入300ulPBS洗细胞两次，去掉洗液。EdU细胞增殖检测试剂盒在社会上的重要性。江苏品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒优势

使用EdU细胞增殖检测试剂盒前的安全检查。河北提供EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好

EdU细胞增殖检测试剂盒稳定：适用于对细胞增殖状况的连续观察●经济：无需裂解细胞，细胞可继续培养或用于其他实验●可靠：文献引用率高，Pubmed有上千篇文献的引用AlamarBlue®的应用●监测细胞的生长增殖状态、研究细胞周期、细胞凋亡●监测生长因子活性，评估生长因子对细胞增殖的影响●物尤其是药物的开发●环境污染物质的评估，细胞毒分析●效价评估细胞增殖过程中，细胞体内的环境由氧化环境变化成还原环境，呼吸链中的NADPH/NADP,FADH/FAD,FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高。alamarBlue®的活性成分resazurin（刃天青）是一种无毒、可透膜的蓝色染料，有微弱的荧光性河北提供EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好