湖南正规EdU细胞增殖检测试剂盒

EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU检测染料只有BrdU抗体大小的1/500，在细胞内很容易扩散，无需DNA变性（酸解、热解、酶解等）即可有效检测，可有效避免样品损伤，在细胞和组织水平能更准确地反映细胞增殖等现象。EdU染色(a)通过用10:1去离子水稀释10x反应缓冲液进行配制1xEdU反应缓冲液；(b)按照溶解200mg缓冲添加剂溶于1ml去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解，即为可用的缓冲添加剂的浓度，建议现用现配；注：缓冲添加剂为白色粉末，较难准确称量，称量范围可稍微放宽，但是不应超过±20%，且该粉末较易氧化，使用后请旋紧管盖，如试剂出现棕黄色，则需报废或更换。使用EdU细胞增殖检测试剂盒前的安全检查。湖南正规EdU细胞增殖检测试剂盒

    摇床孵育5分钟，以中和过量的多聚甲醛；(c)弃甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室温清洗5分钟；(d)每孔加入300ulTritonX-100细胞通透液，室温通透10分钟，弃细胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室温清洗5分钟；染色反应液组分500ul1ml2ml5mlIX反应缓冲液430ul860ulmlml催化剂溶液20ul40ul80ul200ulTAMRA红色荧光溶液ulul5ulul缓冲添加剂50ul100ul200ul500ul(d)每孔加入100ul配置好的检测混合液，以覆盖细胞为宜，避光、室温孵育30分钟。(e)弃染色反应液，加入300ulTritonX-100细胞渗透液清洗2-3次，每次10分钟；(f)弃细胞渗透液，用PBS洗两次，每次5分钟。DNA染色(a)将Hoechst33342用PBS溶液1:1000进行稀释得到终浓度为5ug/ml的lxHoechst染色液；(b)每孔加入300ul1xHoechst染色液，室温避光孵育20-30分钟后，弃染色液；(c)每孔加入300ulPBS洗细胞两次，去掉洗液。河北正规EdU细胞增殖检测试剂盒说明书EdU细胞增殖检测试剂盒去哪买？

    注：1）培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态；2）孵育时间至少2小时，可延长至24小时后再检测也可以。4、以1×PBS清洗细胞两次，每次5分钟，以除去未掺入RNA的EU残留。注：贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。细胞的固定和通透1、每孔加入150μl细胞固定液，室温培养30分钟，弃固定液；注：1)该试剂盒配备了细胞固定液，也可以使用含4%多聚甲醛的PBS来进行细胞固定；2)如果使用其他的细胞固定剂建议用DEPC水来配置，避免RNA酶降解细胞内的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸，摇床孵育5分钟；3、弃甘氨酸溶液，每孔加入300μlPBS洗液，室温清洗5分钟；4、每孔加入300μlTritonX-100细胞通透液，室温通透10分钟，弃细胞通透溶液；5、每孔加入300μlPBS洗液，室温清洗5分钟；EU染色1、通过用10：1去离子水稀释10×反应缓冲液进行配制1×EU反应缓冲液；2、按照溶解200mg缓冲添加剂溶于1ml去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解，即为可用的缓冲添加剂的浓度，建议现用现配；注：缓冲添加剂为白色粉末，较难准确称量，称量范围可稍微放宽，但是不应超过±20%，且该粉末较易氧化，使用后请旋紧管盖，如试剂出现棕黄色，则需报废或更换。

该方法无需DNA变性，无需抗原修复，无需抗原抗体反应，简单、灵敏、快速、准确，适合各种细胞系的细胞增殖检测，尤其适用于各种细胞系的高通量筛选实验，如在药物筛选中检测加药后细胞增殖变化。EdU方法无需DNA变性，完全适用于各种显微成像技术，在10X，20X，40X都能得到很好的成像效果。EdU细胞增殖检测方法不需要剧烈的DNA变性操作，只需温和的细胞固定化和透化处理，能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点。EdU细胞增殖检测试剂盒使用时的注意事项。

本试剂盒使用便捷、兼容性好。本试剂盒只需常用的多聚甲醛固定和Triton X-100穿透，就可以使叠氮化物探针有效进入细胞并发生点击反应，不会影响细胞形态，不会影响基于抗体的免疫荧光和免疫组化检测，也不会影响DNA的荧光染色(如PI染色检测细胞周期、DAPI或Hoechst染料检测细胞核)。而BrdU法为了使大分子的BrdU抗体进入细胞并与DNA上的BrdU结合，需要对双链DNA进行变性处理(如酸变性、热变性或者DNase消化等)，这种变性可能会影响细胞形态，影响后续的免疫荧光和免疫组化检测、DNA的荧光染色等。BrdU法和BeyoClick™ EdU法检测原理的比较参见图2。EdU细胞增殖检测试剂盒的发展前景如何呢？河北正规EdU细胞增殖检测试剂盒说明书

上海东寰向您介绍EdU细胞增殖检测试剂盒的好处。湖南正规EdU细胞增殖检测试剂盒

    避免反复冻融。如短时间内需多次重复使用，请于4℃避光保存，有效期半年。使用前须知该试剂是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测，适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EU后进行细胞涂片处理，固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。实验准备1、盖玻片2、1×PBS（）（用DEPC水配置）3、含TritonX-100的PBS（用DEPC水配置）4、甘氨酸溶液(2mg/ml)（用DEPC水配置）5、培养板或培养皿实验参考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培养基100μl200μl300μl500μl1ml染色反应液100μl200μl300μl500μl1ml实验步骤(以96孔板，HK2贴壁细胞为例)细胞培养取对数生长期细胞，以每孔4×103~1×105细胞接种于96孔板中，培养至正常状态。EU标记1、将细胞完全培养基中按照500：1的比例加入EU溶液，制成2×EU标记培养基；2、提前将2×EU标记培养基预热，然后等体积加入到细胞原有培养基中，获得1×EU溶液，其中EU的终浓度为500μM；注：1）我们不建议替换全部培养基，因为这样可能会影响细胞增殖的速度；2）配置好的培养基建议现用现配，用量以没过细胞为宜；3、每孔加入300μl含EU培养基孵育细胞2小时，弃培养基。湖南正规EdU细胞增殖检测试剂盒