如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒购买

EdU细胞增殖分析试剂采用click化学技术，可为新合成的DNA检测与定量提供比传统BrdU方法更的替代物。当在DNA合成过程中掺入修饰的核苷EdU（5-乙炔基-2-脱氧尿苷）时，可以通过快速的“click化学”反应检测到它，并且对细胞的破坏作用小。点击化学相比于BrdU具有更简便、更快速、更易操作的优点。与使用溴脱氧尿苷(BrdU)检测法不同，Click-iTEdU检测法不是基于抗体，因此并不需要DNA变性以检测掺入的核苷。此外，Click-iTEdU可以与R-PE、R-PEtandems和GFP等荧光蛋白复用提高效力。当您平行比较这些方法时，Click-iTEdU和InvitrogenClick-iTPlusEdU在测定细胞增殖方面的优势是显而易见的。EdU细胞增殖检测试剂盒如何发挥重要作用？上海东寰告诉您。如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒购买

上海东寰活细胞能将四咪唑盐（如MTT、XTT、WST-1）还原成有色的甲瓒或甲瓒盐（Formazan），可通过分光光度计或酶标仪进行检测。CellCountingKit–8（96992）和CellProliferationReagentWST-1中的WST-8被细胞内脱氢酶生物还原后生成的橙色甲臜染料能够溶解在组织培养基中，生成的甲臜量与活细胞数量成正比。基于CCK-8（WST-8）的试剂盒能高度准确地检测细胞增殖，比MTT法及XTT法的灵敏度高5倍，能检测更低的细胞数目。该试剂盒可适用于96孔板培养的贴壁或悬浮细胞。北京品牌EdU细胞增殖检测试剂盒EdU细胞增殖检测试剂盒的优点体现在哪？

    试剂盒以外自备试剂和仪器：●PBS●纯水●1%乙酸●移液器及吸头●有515nm波长的酶标仪使用方法：使用注意事项：●接种时注意细胞悬液一定要混匀，以避免细胞沉淀下来，导致每孔中的细胞数量不等，可以每接种几个孔就混匀一下。培养板周围一圈孔培养基容易挥发，为了减少误差，建议培养板的四边每孔只加培养基，而不作为指标检测孔。●培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而异。●用水或乙酸洗细胞时充满孔后保持一会倒掉即可，也可以用排或洗板机。●OD值在1-2之间较好。以96孔板为例：1．取出培养好待测的96孔板。2．在培养基表面小心加入50μl固定液(悬浮细胞加100μl固定液)，静置5分钟后放入4℃冰箱30分钟-1小时。(贴壁细胞可弃培养基后加入用水3倍稀释的固定液；悬浮细胞必须直接加入固定液，轻加在培养液面，静置5分钟后再将平板移至4℃放置1小时，可使悬浮细胞固定在培养孔底部)。

EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一种胸腺嘧啶核苷类似物，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶（T）渗入正在复制的DNA分子中，通过基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性，适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究，尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。与BrdU检测方法相比，EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU与T非常相似，而EdU染料只有BrdU抗体的1/500，在细胞内很容易扩散，无需DNA变性（酸解、热解、酶解等），可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应，能在细胞和组织水平更准确地反映DNA复制活性。EdU细胞增殖检测试剂盒使用时要考虑什么问题？

    注：1）培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态；2）孵育时间至少2小时，可延长至24小时后再检测也可以。4、以1×PBS清洗细胞两次，每次5分钟，以除去未掺入RNA的EU残留。注：贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。细胞的固定和通透1、每孔加入150μl细胞固定液，室温培养30分钟，弃固定液；注：1)该试剂盒配备了细胞固定液，也可以使用含4%多聚甲醛的PBS来进行细胞固定；2)如果使用其他的细胞固定剂建议用DEPC水来配置，避免RNA酶降解细胞内的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸，摇床孵育5分钟；3、弃甘氨酸溶液，每孔加入300μlPBS洗液，室温清洗5分钟；4、每孔加入300μlTritonX-100细胞通透液，室温通透10分钟，弃细胞通透溶液；5、每孔加入300μlPBS洗液，室温清洗5分钟；EU染色1、通过用10：1去离子水稀释10×反应缓冲液进行配制1×EU反应缓冲液；2、按照溶解200mg缓冲添加剂溶于1ml去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解，即为可用的缓冲添加剂的浓度，建议现用现配；注：缓冲添加剂为白色粉末，较难准确称量，称量范围可稍微放宽，但是不应超过±20%，且该粉末较易氧化，使用后请旋紧管盖，如试剂出现棕黄色，则需报废或更换。EdU细胞增殖检测试剂盒怎样使用？上海东寰告诉您。北京品牌EdU细胞增殖检测试剂盒

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细胞增殖的研究方法有很多，主要包括：BrdU，EdU，CCK8等方法。其中EdU检测方法是新的细胞增殖检测方法。细胞增殖是生物体的重要生命特征，细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物，以细胞分裂的方式产生新的个体。真核生物的分裂依据过程不同有三种方式，有有丝分裂，无丝分裂，减数分裂。其中有丝分裂是人、动物、植物、等一切真核生物中的一种普遍的分裂方式，是真核细胞增殖的主要方式。减数分裂是生殖细胞形成时的一种特殊的有丝分裂。如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒购买