湖南哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒原理

EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)，中文名为5-乙炔基-2-脱氧尿苷，是一种新型胸苷(胸腺嘧啶脱氧核苷，thymidine)类似物，EdU可以在DNA合成过程中替代胸苷掺入到新合成的DNA中。另一方面，EdU上的乙炔基能与生物素标记的叠氮化物(Biotinlabeledazide)通过一价铜离子的催化发生共价反应，形成稳定的三唑环，该反应非常迅速，被称作点击反应(Clickreaction)，其反应原理参见图1。通过点击反应，新合成的DNA会被相应的生物素探针所标记，从而可以使用适当的检测设备检测到增殖的细胞。EdU细胞增殖检测试剂盒使用时的注意事项。湖南哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒原理

测定ATP水平检测细胞增殖活细胞需要不断以ATP的形式输入自由能，因此通过检测ATP的增加水平可检测细胞增殖。ATPBioluminescenceAssayKitHSII及ATPBioluminescenceAssayKitCLSII是通过经典的荧光素酶发光对ATP检测定量的试剂盒。前者主要应用于高灵敏度检测极低浓度ATP的实验，后者主要应用于当有持续信号产生而需要高重复性结果的实验。DNA的合成的检测：DNA的新组装合成是细胞生长的必要条件，故经常被用来进行细胞增殖、细胞活力及凋亡的检测。BrdU及EdU，都是胸腺嘧啶的非放射性类似物，能掺入增殖细胞的DNA中，可通过对BrdU及EdU的检测，从而对DNA的合成量进行测定。安徽提供EdU细胞增殖检测试剂盒说明书EdU细胞增殖检测试剂盒生产厂家。

与BrdU方法相比，EdU检测方法无需DNA变性，无需抗原修复，无需抗原抗体反应，更简单、更灵敏、更快速、更准确，是细胞增殖检测的比较好选择。更准确--无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)，可有效避免变性带来的样品损伤，确保细胞核边缘清晰完整；更简单--无需抗原抗体反应，基于小分子化学反应的检测方法，简单高效，反应单需要几分钟；更灵敏--无需抗体，检测染料单为BrdU抗体的1/500，更容易扩散，即使单个增殖细胞也能准确检测；更快速--无需过夜，省却了抗原抗体反应的复杂繁琐步骤，完成整个检测周期单需2.5小时；更兼容--对样品几乎无损伤，更容易与多种抗体或荧光蛋白同时标记，能够同时检测细胞其他性状特征~

通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应，把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面，这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性，广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU标记培养基；(b)提前将2xEdU标记培养基预热，然后等体积加入到细胞原有培养基中，获得lxEdU溶液，其中EdU的终浓度为10uM；注：1)我们不建议替换全部培养基，因为这样可能会影响细胞增殖的速度；2)配置好的培养基建议现用现配，用量以没过细胞为宜；(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时，弃培养基；注：1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态；2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次，毎次5分钟，以除去未掺入DNA的EdU残留。注：贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。使用EdU细胞增殖检测试剂盒能给人们带来便利吗？

    试剂盒以外自备试剂和仪器：●PBS●纯水●1%乙酸●移液器及吸头●有515nm波长的酶标仪使用方法：使用注意事项：●接种时注意细胞悬液一定要混匀，以避免细胞沉淀下来，导致每孔中的细胞数量不等，可以每接种几个孔就混匀一下。培养板周围一圈孔培养基容易挥发，为了减少误差，建议培养板的四边每孔只加培养基，而不作为指标检测孔。●培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而异。●用水或乙酸洗细胞时充满孔后保持一会倒掉即可，也可以用排或洗板机。●OD值在1-2之间较好。以96孔板为例：1．取出培养好待测的96孔板。2．在培养基表面小心加入50μl固定液(悬浮细胞加100μl固定液)，静置5分钟后放入4℃冰箱30分钟-1小时。(贴壁细胞可弃培养基后加入用水3倍稀释的固定液；悬浮细胞必须直接加入固定液，轻加在培养液面，静置5分钟后再将平板移至4℃放置1小时，可使悬浮细胞固定在培养孔底部)。 上海东寰EdU细胞增殖检测试剂盒的运用领域。河南哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒供应商

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EdU细胞增殖检测：EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一种胸腺嘧啶核苷类似物，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶（T）渗入正在复制的DNA分子中，通过基于EdU与Apollo荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性，适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究，尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。与BrdU检测方法相比，EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU染料只有BrdU抗体的1/500，在细胞内很容易扩散，无需DNA变性（酸解、热解、酶解等），可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应，能在细胞和组织水平更准确地反映DNA复制活性。湖南哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒原理

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