普陀区疾病动物模型建模厂家

1、动物模型名称：胆管结扎致肝胆管性肝硬化大鼠模型2、实验动物种属：SD大鼠3、实验动物性别：雄性4、实验动物年龄：5周5、实验动物体重：200~220g6、实验动物环境：SPF级 1、实验方法：用胆管结扎法。大鼠按10mg/kg体重腹腔注射3％戊巴比妥钠麻醉，腹部皮肤消毒，无菌操作沿腹部正中线剪开腹腔，分离出胆管，在胆管近端和远端2处结扎胆管。手术后正常饲养28天。28天后解剖取肝脏进行组织病理学检查。2、检测标准：肝脏病理切片镜下小胆管伴纤维组织增生积分按程度为0-3分：0分：无明显病变；1分：呈局灶性分布，受累面积在30%以下者；2分：呈多灶性分布，受累面积在30%-70%之间者；3分：呈弥漫性分布，受累面积在70%以上者。统计分析：每份标本在低倍视野(10×10)下依次选取左上、右上、左下、右下、中间5个视野（共1.5mm2）进行观察，测定并计算视野内小胆管伴纤维组织增生总面积。上海东寰在动物建模方面已经有了多年的技术经验。普陀区疾病动物模型建模厂家

    该模型能够帮助我们研究pirb基因在免疫系统和神经系统的功能以及下游的调节机制。本发明的另一目的在于提供上述小鼠动物模型的构建方法。本发明所采用的第一种技术方案是：pirb基因敲入的小鼠动物模型，包括确定pirb基因的待敲入的特异性靶位点grna1和grna2，将pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的内含子1内，所述grna1的基因序列如seqid**所示，grna2的基因序列如。本发明所采用的第二种技术方案为：pirb基因敲入的小鼠动物模型的构建方法，具体按照以下步骤实施：步骤1、基于crispr/cas9技术构建针对c57bl/6j小鼠rosa26基因的特异性grna1和grna2，grna1的基因序列如seqid**所示，grna2的基因序列如；步骤2、构建“cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya”基因盒打靶载体，将打靶载体进行线性化处理；步骤3、步骤2中将含有loxp位点打靶载体、步骤1中有活性的grna1和grna2与cas9蛋白共同注射进入**小鼠受精卵中，获得f0代小鼠；步骤4、将步骤3中性成熟的阳性f0小鼠分别与野生型鼠交配繁一代，获得f1代杂合子小鼠，通过pcr、测序和southern杂交确定动物基因型；步骤5、将步骤4获得的f1代杂合子小鼠近交获得f2代纯合子小鼠。黄浦区哪家公司提供疾病动物模型建模动物疾病模型广泛应用于疾病机制研究。

1、自发性**动物模型:未经人为处理;自然发生;自发性**的总体评价--动物自发性**的病因往往是由动物的遗传特性决定的与人痒的病因有较大距离。各动物**生长速度差异较大很难在限定时间内获得大量生长均匀的荷瘤动物(tumor-bearinganimals)。因此，自发性**动物模型很少在抗**药物的常规筛选中广泛应用。2、诱发性**动物模型:在实验条件下:使用致*物(carcinogens);诱发动物发生**animalmodelofinducedtumor)指使用致*因素(carcinogens)在实验条件下诱发动物发生**的动物模型，它是进行实验**学研究的常用方法。常用于验证可疑致*因素的作用也越来越多地应用干**发生机理的研究及防治效果的观察上，在**病因学、遗传学、生物学等方面的研究中有重要地位。由于诱发因素和条件可人为控制，诱发率远高于自然发病率故在**实验研究中优于自发瘤。用于诱发实验性**的动物种类很多，它们因种族不同而对相同致*因素有不同的反应性。常用的动物以哺乳动物为主，其中啮齿类动物的使用**多，应用**广，包括各种大鼠、小鼠、际鼠等。。

    配制成6mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg分别在***天及第八天腹腔注射。实验建立大鼠卵巢早衰模型1.实验仪器及材料：如表1所示。表12.实验方法：①动物信息：sd大鼠，雌性，6-8周，体重180-220g。普通环境饲养，灭菌饲料饲养，自由饮水。②分组及给药剂量：如表2所示。表2③给药途径及频率：腹腔注射；2mg、3mg组连续注射7天；4mg、6mg组***天、第八天注射；对照组连续7天注射生理盐水。④病理检测：末次注射后15天，动物麻醉，采集血液，分离血清，elisa法测定血清中e2、fsh、lh水平变化情况。解剖动物，取卵巢组织称重，对大鼠的卵巢组织形态学进行观察。注射期间每天称重，给药后每周称重两次，每天进行阴道涂片检测动情周期。3.统计方法：采用graphpad进行统计分析。所有计量资料均采用均值±标准差表示采用单因素方差分析各组间均值的差异，p＜。4.试验结果：(3mg组注射完成后*存活一只，不进行统计)如表3、表4、图1、图2、图3所示：①***水平：与空白组相比，2mg组、4mg组、6mg组e2水平均降低，但是只有2mg组有明显降低(p＜)，如图1所示；与空白组相比，2mg组、4mg组、6mg组fsh水平均上升，只有2mg组有明显升高(p＜)，如图2所示；与空白组相比。上海东寰为您提供完善的大鼠动物疾病模型。

    即为本发明构建的一种pirb基因敲入的小鼠动物模型。本发明所采用第二种技术方案的特点还在于，步骤1中得到grna1和grna2后分别与trancrrna在25℃孵育10min形成二级结构。步骤3中grna1、grna2的浓度均为2～10pmol/ul，cas9蛋白的注射浓度为30～100ng/μl。步骤4中southern杂交采用bamhi和avrii核酸内切酶切割f1代杂合子小鼠的dna。本发明的有益效果是：本发明提供了pirb基因敲入的小鼠动物模型及其构建方法，本发明的小鼠动物模型对于pirb基因功能的研究和在体验证提供了良好的基础。分离自pirb基因敲入小鼠的细胞还可以用于研究pirb发挥调节作用的下游机制。通过pirb敲入动物模型与不同类型cre小鼠的杂交，可以用于研究ad不同***或不同细胞类型pirb的调节作用。附图说明图1为本发明pirb基因敲入的小鼠插入pirb基因cds和loxp位点的打靶质粒载体的构建图；图2为本发明pirb基因敲入的小鼠模型的构建方法的流程图；图3为本发明f1代pirb敲入的小鼠的基因型pcr结果鉴定电泳图；图4为本发明f1代pirb敲入的小鼠验证pirb基因敲入效果的测序峰图；图5为本发明f1代pirb基因敲入的小鼠进行southern鉴定的方法示意图；图6为本发明f1代pirb基因敲入的小鼠进行southern鉴定的结果图。疾病动物模型建模有加些方式？哪一家疾病动物模型建模价格

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    得到大鼠慢性背根神经压迫模型。进一步地，l型棒的直径为，***端长3-5mm，第二端长1-3mm。具体地，根据大鼠体重选择l型棒的直径大小：当大鼠体重在200g到不足220g范围时，采用直径为；当大鼠体重在220g到不足250g范围时，采用直径为；当大鼠体重在250g到不足300g范围时，采用直径为；当大鼠体重在300g到350g范围时，采用直径为。在另一个具体实施方式中，压迫元件为u型棒；步骤三具体为：将u型棒的***端和第二端分别插入到左侧或右侧腰4椎间孔及腰5椎间孔中，得到大鼠慢性背根神经压迫模型。进一步地，压迫元件采用不受磁场干扰、置入体内不会对神经造成化学刺激以及具有一定可塑性的材料制备而成。在一个具体实施方式中，压迫元件采用黄铜和锌的混合物制备而成。具体地，混合物为h62黄铜，即含铜量为％～％，余量为锌含量的黄铜。而铜、锌皆属于非铁磁性物质。在另一个具体实施方式中，压迫元件采用聚乳酸(polylactic，pla)制备而成。pla是一种无毒无刺激的合成高分子材料，其原料是乳酸，不含任何金属。h62黄铜棒或pla棒在体内，即不会受磁疗、电疗引起的磁场、电场干扰，也不会对磁疗、电疗仪器及磁共振仪器产生不良影响。普陀区疾病动物模型建模厂家

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