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Microenvironment-inducedPTENlossbyexosomalmicroRNAprimesbrainmetastasisoutgrowth。思路:2.那么到底是脑微环境中的哪种细胞,哪种物质介导,致使PTEN丢失呢?作者想想脑内的**细胞周围无非是:星形胶质细胞,**相关成纤维细胞(CAF),正常成纤维细胞,就把这些细胞分别与**细胞共培养,发现只有与星形胶质细胞共培养后,PTEN的表达明显下降。接着作者就把星形胶质细胞给干扰掉,把星形胶质细胞内特异性靶向PTEN丢失的microRNA干掉,发现脑转移的**细胞内的PTEN没有丢失,瘤体也变小了。得出第二个结论:星形胶质细胞来源的miR-19a沉默了**细胞中的PTEN。 云生物抽提的外泌体通过多种方法鉴定。上海血液样本抽提外泌体多少钱
血清样品(有条件的话尽量采用血浆,避免血小板来源的外泌体影响):
(1) 用采血针和普通血清管(不含任何试剂,10ml规格)采血10 ml;
(2) 室温静置 30 min,然后4°C条件下,静置3-4小时(此时可见血块析出);
(3) 用移液器吸取上面的淡黄色血清(应该有4 ml左右)转入15 ml离心管中,4°C条件下 3000g离心15min,小心取上清转入新的15 ml离心管中,**程度保证血清质量;
(4) 离心后的血清15分钟内冻存于-80°C冰箱;
提示:送样量**4 ml以上(分离4 ml血清约需要10-15ml全血)。
广东电镜外泌体活动尿液的外泌体怎么制备?在一项发表于Nanoscale杂志的研究中,研究者提出了一种基于新型巯基(NovelThiol-Based)的胞外囊泡荧光标记方法,采用共聚焦显微镜等方法观察在*细胞源性外泌体在***细胞中的动态变化。制备荧光标记外泌体的步骤如下:1.取200μg/ml的C5-马来酰亚-Alexa488(绿色荧光)或C5-马来酰亚-Alexa633(红色荧光)µl,加入提取好的含60-100µg蛋白质的30ul外泌体样品中,以PBS补足至50ul,不搅拌的情况下于暗室中室温孵育60分钟。2.在孵育时将exosomespincolumns(Invitrogen)试剂盒按照说明书准备好并将粉末树脂于室温下水合15-30分钟。3.将装有柱子的收集管于离心机水平转子中以750xg离心2分钟,弃收集管,向树脂中加入荧光染料孵育后的外泌体4.将柱子置于xg离心3分钟,多余的染料会被树脂吸附5.荧光标记后的外泌体缓慢加入1000ul不含酚红的DMEM,于μm过滤膜过滤后。分装并储存于负80度备用。以这种方法制备的外泌体在HELA细胞中,随着时间延长,带有绿色荧光(EV488)的外泌体逐渐密集于细胞核周围,可以明显观察到外泌体的动态变化过程。
转移的**细胞为适应新环境,沉默了自己的基因,促进**转移灶形成,而沉默基因的正是外泌体中的microRNA。文章概要为:“Microenvironment-induced PTEN loss by exosomal microRNA primes brain metastasis outgrowth”,由外泌体分泌的microRNA引起微环境介导的PTEN丢失,为脑转移生长做了准备。这篇是2015.10.19发表在Nature 上的文章,文章主要讲的是,脑环境依赖的PTEN可回复性表达,受脑内的星形胶质细胞分泌的外泌体中的microRNA调控。云生物抽提的外泌体质量很好。
**外泌体作用机制研究进展- **免疫中外泌体的多重角色
- 外泌体MiRNA依赖的**转移级联
- *细胞外泌体PD-L1干扰免疫
- 外泌体改造**微环境
- 外泌体调节**免疫信号轴
- **耐药性的外泌体传达外泌体分离提纯与检测技术进展- 高精度外泌体分离控制
- 通用的外泌体提取方法
- 外泌体多维标记追踪
- 外泌体新型成像与检测
- 基于微流控技术的外泌体分离分析
- 临床级外泌体生产关键要素外泌体生物学事件研究进展- 外泌体内容物多样性与整体效应
- 外泌体MiRNA, LncRNA, mRNA, CircRNA作用
- 外泌体成分与亲本细胞关系
- 外泌体MiRNA介导细胞间应答
- 外泌体驯化免疫细胞
- 外泌体远程信号递送方式外泌体的临床开发应用- **细胞外泌体PD-L1开发策略
- **免疫***的外泌体途径
- 外泌体MiRNA的临床诊断价值
- 外泌体的靶向修饰
- RNA药物的外泌体载体改装
- 外泌体标志物多中心临床试验 云生物专业外泌体服务。上海血液样本抽提外泌体多少钱
云生物主营产品很多,包括外泌体抽提和测序。上海血液样本抽提外泌体多少钱
体液样本收集外泌体。唾液是一种较易受各种因素影响的的液体。主要通过3个腺体(舌下腺,颌下腺和腮腺)和口腔内其他较小的腺体产生。唾液里包含多种糖蛋白,***化合物和分泌型抗体等。关于唾液里的外泌体研究相对较少。但是一些口腔*、自身免疫性疾病的研究,牵涉到唾液里胞外囊泡。
1、样本处理和外泌体分离:
采集样本低速离心和过滤去除可能存在的细胞、细菌以及潜在的食物残渣在分离外泌体之前。唾液标本采用真空过滤系统比注射器过滤器不容易堵塞。冰上冷冻保存。然后开始分离如外泌体。 上海血液样本抽提外泌体多少钱