四川hMeDIP-SeqDNA甲基化共同合作

荧光定量法（Methylight）：这种技术是在MSP技术上发展起来的，在MSP扩增过程中利用荧光染料进行定量。TaqMan?探针法的应用使得该技术具有更高的精确性。其原理与SNP检测类似，针对亚硫酸氢盐处理之后的DN**段，在甲基化位点上会存在单碱基的差异，根据这种差异进行探针设计，随后进行实时定量PCR，就能够检测甲基化的差异。这种方法**的优势在于其高敏感性和较高通量，且无需在PCR后电泳、杂交等操作，减少了污染和操作误差。但是TaqMan?探针订购费用较高，适用于少数位点大量样本筛选。6mA在细菌、藻类及动植物基因组中存在。四川hMeDIP-SeqDNA甲基化共同合作

NA甲基化（DNA methylation）是指在DNA甲基化转移酶（DNMT）催化下，以S-腺苷甲硫氨酸为甲基供体，将活性甲基转移至DNA链中特定碱基上的化学修饰过程。哺乳动物基因组中，DNA甲基化多发生在CpG二核苷酸中的胞嘧啶的5位碳原子。DNA甲基化是一种表观（epigenetic）修饰，它在不改变DNA序列的情况下，对个体的生长、发育、基因表达模式以及基因组的稳定性起到重要的调控作用，并且这种修饰在发育和细胞增殖的过程中是可以稳定传递的。近年来的大量研究表明，DNA异常甲基化与**的发生、发展、细胞*变有着密切的联系。江苏hMeDIP-SeqDNA甲基化共同合作甲基化验证方案是TBS。

**预防和***的一个手段是通过去甲基化恢复某些关键的抑*基因或DNA修复基因的活性，目前研究**多的是DNMTs抑制剂，它通过抑制DNMT活性以逆转异常的DNA甲基化。**个表型修饰药物为5-azacytidine及其类似物5-aza-2'-deoxycytidine（5-aza-CdR），这类药物已经美国FDA批准用于白血病前骨髓增生异常综合征的***。5-aza-CdR是胞嘧啶的类似物，在DNA复制过程中可以掺入到DNA链中，一方面它可以降低DNA接收甲基的能力，另一方面它抑制DNMT活性，导致DNA甲基化水平的降低。体外和体内试验均表明，5-aza-CdR具有降低超甲基化的抑*基因甲基化水平从而抑制**的能力，临床表明应用5-aza-CdR可提高部分IV期小细胞肺*患者生存率，但该药也存在着不可忽视的毒副作用（如特异性不强，不能针对某一特定抑*基因进行靶向***；高剂量的5-aza-CdR可能诱发**的转移），因此其在临床上的应用受到了很大限制。也有研究表明，低剂量的As2O3可起到***肝*的目的。

DNA甲基化作为表观遗传学研究的重要范畴，已经越来越受到研究者的关注。近些年来，随着DNA甲基化与组蛋白甲基化的联合作用机制、RNA干扰机制及去甲基化机制的发现，使得DNA甲基化研究受到***关注，从医学领域扩展到动植物研究当中，同时在研究方法上也取得了很大的突破。现在用于DNA甲基化检测的方法大概有十多种，从应用上来分，大致可以分成两类：全基因组甲基化分析及特异位点甲基化检测。下面，我们就这两大类检测技术进行分析比较，以便于在实际的科研工作中进行选择。云生物提供DNA甲基化和羟甲基化的表观实验和信息分析技术服务。

重亚硫酸盐处理结合测序是目前检测甲基化的金标准。除了全基因组甲基化测序技术等研究手段，对于大样本量甲基化研究来说，更需要灵活、有针对性的技术方案。NGS-BSP方法适合几个到几十个基因或者位点进行大样本甲基化测序或者验证项目，具有更快速的实验周期及低成本优势。单碱基分辨率针对目标序列，非常灵活适合多种样本类型应用方向：450K/850K芯片筛选的差异甲基化CpG位点(DMS)。技术优势：高效灵活的目标区域甲基化检测的工具BSP和高通量测序完美结合，单碱基分辨率适合几个到几十个位点的大样本验证项目适合所有动物样本、周期快、检测位点灵活、性价比高。通过甲基化数据与耐药基因Panel数据联合分析。上海焦磷酸测序DNA甲基化活动

cfDNA，cell free DNA，就是血液中游离的自身DNA。四川hMeDIP-SeqDNA甲基化共同合作

全基因组甲基化测序（Whole Genome Bisulfite Sequencing, WGBS）是将重亚硫酸盐Bisulfite处理和高通量测序技术相结合，对有参考基因组进行全基因组范围的单碱基分辨率的甲基化测序，是DNA甲基化检测的“金标准”。WGBS满足全基因组DNA甲基化图谱及疾病关联分析、基因调控分析、疾病的甲基化标志物筛选等探索性课题的研究。技术优势：DNA甲基化检测**有力的工具，单碱基分辨率，检测每个C碱基的甲基化状态，全基因组范围，**限度地获得甲基化信息，适合所有有参考基因组的物种适合各种类型的样本。四川hMeDIP-SeqDNA甲基化共同合作