浙江电镜外泌体售后分析
尿液可通过无创的方式收集并且含有泌尿系统发生疾病时(包括**)产生的外泌体,其性质稳定且RNA含量高于尿液中的细胞内的RNA。
1、尿液的收集:
1).尽量选择受试者的“新鲜”尿液,并注意避免细菌污染。受试者的亲属(性别相同、年龄相仿)可作为对照。
2).注意对饮食的控制。
乳汁,乳汁是一种非常复杂的混合物,其中含有蛋白质、脂质、细胞以及其他重要的物质。人类的乳汁中含有许多非营养性生物活性物质,例如母体细胞、抗体、化学介质、维生素和酶。近来已有研究表明乳汁中含有外泌体。 血液样本的外泌体怎么制备?浙江电镜外泌体售后分析
体液样本收集外泌体。唾液是一种较易受各种因素影响的的液体。主要通过3个腺体(舌下腺,颌下腺和腮腺)和口腔内其他较小的腺体产生。唾液里包含多种糖蛋白,***化合物和分泌型抗体等。关于唾液里的外泌体研究相对较少。但是一些口腔*、自身免疫性疾病的研究,牵涉到唾液里胞外囊泡。
1、样本处理和外泌体分离:
采集样本低速离心和过滤去除可能存在的细胞、细菌以及潜在的食物残渣在分离外泌体之前。唾液标本采用真空过滤系统比注射器过滤器不容易堵塞。冰上冷冻保存。然后开始分离如外泌体。 上海分离外泌体哪家好云生物抽提的外泌体质量怎么样?
胸水:
(1) 临床收集胸水后若不能**时间处理,请于4℃临时保存(不得超过8 h);
(2) 将收集到的胸水1000 g离心10 min,收集上清液;
(3) 将得到的胸水上清3000 g离心10 min,收集上清;
(4) -80℃冰箱中保存。
腹水:
(1) 临床收集腹水后若不能**时间处理,请于4℃临时保存(不得超过8 h);
(2) 将采集到的腹水在4℃下(室温亦可)离心2000 g,20 min,去除腹水中的残渣;
(3) -80℃冰箱中保存。
胆汁:(1) 用无菌容器收集胆汁;
(2) 将收集到的胆汁在4℃下,3000 g离心10 min去除细胞沉渣和碎片;
(3) 收集胆汁上清液,4℃或者-20℃长期保存。
样本准备注意事项:●采集的样本需要符合纳入标准:如年龄、肥胖(身高、体重)、血糖血脂血压、诊断情况等。●统一早晨空腹采血,尽量避免样本间的差异影响。●如个别样本发生溶血,则弃掉。●样本编号用油性笔清楚地写在管壁及管盖上。●离心管在放入冰箱前,用封口膜密封。●如果提供的是冻存细胞株,需提供详尽的复苏方法。●细胞培养基必须使用去除exosome(de-exosome)的血清或者无血清培养基(例如ThermoFisher的SFM)。●分离外泌体前的样品不能加入任何RNA保护剂(如Trizol)。●分离好的外泌体如需进行电镜观察,需要放4°C保存,并且不宜保存太久。●全血建议使用PAXgene管保存,不可冻融,取血后尽早制备血浆或血清,血浆或血清可以-80°C保存,但应避免反复冻融。●储存条件以及储存时间影响外泌体得率,保存在-80℃冰箱中的样本,如果储存时间过长,外泌体产量也会***降低。●干冰运输应采用壁厚且质量完好的泡沫箱,24小时到达的,干冰数量不得低于5公斤;48小时到达的,干冰数量不得低于8公斤;夏季适当增加干冰(倍)。 云生物外泌体拥有完善的售后。
体液样本收集外泌体,唾液需要注意的事项:
1)、包括采样部位;到目前为止,大部分的唾液EVs分析,其样本来自整个唾液,然而,不同腺体分泌的EVs量和成分肯定不一样,所以需要对样本采集标准化,根据不同的研究需要,选取不同的部位来收集唾液。
2)、采样时间;众所周知,唾液分泌有明显的昼夜差异,同时,饮食、吸烟,运动等也很大影响唾液的成分。所以采集的时间也需要标准化。
3)、对受试者的了解;至少1小时内没有刷牙、近几天没有做过口腔护理。其他口腔疾病需要考虑。
4)、采集技术:分为刺激(主动)取样和无刺激(被动)取样。 胸水抽提外泌体需要提供多少量?北京粒径外泌体报价
外泌体抽提有哪些方法呢?浙江电镜外泌体售后分析
分离:超速离心法:超速离心法是外泌体分离**常见的技术之一。据不完全统计,约有1/2的研究者会选择该种方式分离外泌体。该方法由几个离心步骤组成,可分步去除细胞、细胞碎片和大囊泡,沉淀外泌体。但该种方法用于血浆和血清等粘性生物液体时效率较低,且重复离心操作有可能对外泌体造成损害,从而降低其质量。如将超速离心配合蔗糖溶液进行梯度密度离心可得到纯度更高的外泌体,是公认可以得到**高纯度的分离方法。但此法对离心时间非常敏感,一般需要8-30h,产率较低,同样不适用于血浆和血清等粘性生物液体中外泌体的分离,因此难以***普及。聚合物沉淀法:第二大主流的外泌体分离技术就是基于聚合物的沉淀法了,**常见的聚合物是聚乙二醇(PEG)。通常将含有聚合物的沉淀溶液与生物体液混合,4℃温育,低速离心,沉淀外泌体。目前已有成熟的PEG-base商业试剂盒,比如图中的ExoQuick™(SystemBiosciences)。这类试剂盒使用容易和快速,不需要额外的设备,且随着产品不断更新换代,提取效率和纯化效果逐渐提高,因而逐渐取代超速离心法并推广开来。沉淀法的主要缺点是分离物中会有少量的聚合物存在。不过大家不用担心,一般来说这些物质不会干扰下游分析。浙江电镜外泌体售后分析