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Microenvironment-inducedPTENlossbyexosomalmicroRNAprimesbrainmetastasisoutgrowth。思路:4.那么找到了PTEN是星形胶质细胞外泌体中的miR-19a沉默掉的,那么PTEN沉默了之后,**细胞后续发生了什么变化促进了转移灶形成呢?作者用多西环素处理**细胞,要么丢失PTEN,要么出现红色荧光蛋白,发现红色圈圈内的细胞因子CCL2表达差异,接着就抓住这点差异进行研究。**终证明了星形胶质细胞分泌的外泌体,将miRNA转运到原来PTEN正常的**细胞,使PTEN丢失,接着促进**细胞分泌CCL2,招募IBA1+骨髓细胞,促进**细胞扩增,减少凋亡,促进**转移灶形成。联想:**细胞在miRNA调控下,沉默抑*基因促进转移,那么其他**转移到一些脏器是否也存在类似的,增加miRNA沉默抑*基因或是减少miRNA****基因的促进转移呢?。 云生物抽提的外泌体可进行粒径检测。山东数据库外泌体多少钱
云生物外泌体试剂盒优势:a)外泌体结构完整;b)外泌体粒径更加均一;c)外泌体丰度高;d)高丰度蛋白去除效果更***;e)操作简单,省时省力。外泌体鉴定:云生物可提供一整套的外泌体鉴定服务项目,包括:外泌体电镜扫描、Nanosight粒径分析、外泌体标志物WesternBlot鉴定等。电镜观察:鉴于透射电子显微镜(TEM)的工作特点,在外泌体研究中,能够直接观察到样品中外泌体的形态。并且TEM具有很高的分辨率,能够鉴别大小不一的外泌体。实验流程:外泌体制样→电镜观察→拍摄图片→选择图片实验安排:每组拍摄一例样品实验结果:每例样本提供不少于5张电镜原始照片。Nanosight粒径分析:纳米微粒追踪分析术(Nanosight)可以实时地观测外泌体粒径区间,并计算每例样品中外泌体颗粒数,为外泌体的定性和定量提供关键数据,是目前外泌体研究重点推荐的检测技术。实验流程:外泌体制样→上机检测→数据分析→出具报告实验安排:每例样品均需进行Nanosight粒径分析实验结果:中文实验流程与数据分析报告。Western鉴定:云生物推荐了多种外泌体表面marker和抗体,如CD9(24kDa)、CD63(30-60kDa)、TSG101(45kDa)等,可提供多种外泌体常见marker的Westernblot检测服务。 浙江分离外泌体多少钱云生物专业外泌体服务。
体液样本收集外泌体。抽血技巧:操作要轻柔迅速。试管可翻转8-10次使样本与抗凝剂混匀,避免剧烈摇晃。混匀后,将试管固定垂直放置于离心分离器,在顶部记录抽血的准确时间,因为抽血与离心之间的时间间隔可能是一个影响因素。外泌体在抽血后30分钟内是比较稳定的,若时间过长将导致外泌体数量增加。血小板极易因抽血时的物理因素而***并释放出外泌体,其中包括接触、压力、切力。抽血时间:除了血液黏度,体内血液的各项指标在***中变化很大。生理节律会对血小板的***产生很大的影响。白细胞的募集和循环系统中促炎细胞和***细胞会随时间变化。大量的具有特殊表面分子的微粒也被证明会随时间变化。目前尚无设计较好的实验对证实不同时间血液中外泌体的变化,故应在相同的时间采集样本。目前饮食是否会对EV产生影响尚未可知,但是由于脂蛋白可运载RNA且食物的摄取可以影响循环脂蛋白颗粒的类型、数量和作用,故抽血可在***一次用餐后一段确定的时间进行。
外泌体样本准备——血浆样品(不能用肝素抗凝):(1) 用采血针和EDTA抗凝管抽取全血,轻柔上下颠倒混匀后室温或者4°C保存,并在1小时内进行下一步处理;
(2) 4°C条件下,使用吊桶式转头1900 g离心10 min,小心吸取上清即为血浆,***500 μl左右丢弃。得到的血浆再次离心,条件为4°C,3000 g,15 min,小心吸出血浆,注意不要碰到底部和侧面的沉淀物;
(3) 将血浆冻存于-80°C;干冰运输。
提示:送样量**4 ml以上(分离4 ml血浆约需要8-10 ml全血)。 尿液抽提外泌体需要提供多少量?
外泌体(Exosome)是活细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体)的直径30-150nm的纳米级脂质包裹体结构,密度,内部包裹了蛋白质、mRNA和microRNA等物质。包括**细胞在内的几乎所有类型的细胞,都可以产生并释放外泌体。外泌体由细胞分泌释放出来,在血液等体液内传播,***又可被其他细胞吞噬,是细胞间通讯的重要介质。外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液和母乳等,而不同组织来源的外泌体在内容物组成和功能方面存在差异,同时这种差异受到细胞外基质和微环境的动态调控。越来越多的证据表明,宿主细胞或**细胞分泌的外泌体参与了**发生、生长、侵袭和转移。对外泌体的分析和检测可以辅助疾病的早期诊断、疗效评价和预后分析。 外泌体服务就找云生物。浙江分离外泌体多少钱
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**多组学研究:与中山大学附属***医院研究团队合作,在难以获得复发转移肝*组织样本的前提下,根据现有文献进行算法还原、建模及数据库挖掘,获取公共数据库中已有肝*样本(尤其是复发转移)RNA-seq、单细胞测序和部分蛋白组学数据,重新进行分析,几乎是零基础进行;协助其构建了相对完善的组学分析体系,并寻找到多个与复发转移相关的靶点,同时构建了新的临床预测模型。**科研基金:检测服务及数据分析助力取得2020年国自然面上十项、青年基金十八项。山东数据库外泌体多少钱