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    Microenvironment-inducedPTENlossbyexosomalmicroRNAprimesbrainmetastasisoutgrowth。思路：1.作者是怎么发现脑转移的**细胞存在PTEN缺失的呢?又是怎么验证是依赖于脑的环境？其实这点大家都能想到要怎么做（嘿嘿只是没有去做做看，去发现些什么），作者正是把不同来源的**不同转移部位（脑，肺，骨）的基因表达做个热图，发现脑转移的**细胞的共同特点----PTEN丢失，并将原发灶与脑转移灶**细胞进行免疫组化染色，发现PTEN表达正常的原发灶**细胞，转移到脑后PTEN丢失。更有趣的是作者发现，把脑转移的**细胞分离出来培养，PTEN表达回复了；紧接着，作者把这种分离出来的**细胞培养一代后，重新种植到小鼠的脑内和皮下成瘤，发现脑内的PTEN表达又丢失了。得出了***个结论：脑转移灶的可回复性PTEN丢失依赖于脑微环境。 云生物主营产品很多，包括外泌体抽提和测序。广东WB外泌体售后分析

UR51102外泌体**培养基。UR52121适用于细胞上清（尿液），可提取400ml细胞上清液。UR52126适用于尿液，可提取500ml尿液。UR52131适用于血清血浆，可提取20ml，应用于蛋白方向CHEM   COMMUN-IF=6.2-糖基化-UR52136。UR52136适用于血清血浆，可提取30ml，应用于RNA方向。UR52141适用于提取体液，可提取60mlJ CELL   MOL MED-IF=4.7-睾丸损伤-UR52101。UR52111适用于细胞上清液/尿液中外泌体的浓缩J   CELL PHYSIOL-IF=4.5-白血病-UR52121。UR90102试剂盒配套纯化柱。UR52301适用于外泌体CD63和TSG101蛋白的检测。UR52302适用于外泌体的标记染色实验，监测细胞吞噬作用。UR52303适用于外泌体的标记染色实验，监测细胞吞噬作用。UR21017适用于***成像和示踪FRONT。UR33101适用于高效裂解外泌体蛋白，也可用于细胞裂解。UR52135适用于血清血浆，可提取5ml，应用于   RNA 方向。UR52130适用于血清或血浆，可提取6m。UR52100适用于细胞上清或者尿液，可提取100ml。UR52101适用于所有样本CANCER。

广东WB外泌体价格外泌体全转录组测序实验步骤是什么？

    体液样本收集外泌体。1、选择血清还是血浆？推荐大多数研究选择血浆。血液凝固过程中血小板会产生大量外泌体，含量占血清中外泌体的50%以上，选择血浆可避免不必要的影响。2、注意抗凝剂的选择肝素类抗凝剂与PCR假阴性有关，这可能是因为肝素与引物和/或酶有竞争作用。除了***PCR，肝素可以与外泌体结合，阻止细胞摄取外泌体。因此需要记录肝素类药物治疗的患者的血液样本。EDTA和双嘧达莫（CTAD），CTAD可以阻止血小板的***并***其释放外泌体。EDTA可能会干扰PCR反应（尽管其程度小于肝素），但是还是优于其他选择。此外，有研究表明钙螯合剂可在体外促进外泌体与血小板的结合从而降低经EDTA、或柠檬酸盐处理后的血液样本中外泌体的表观数量。使用肝素时这种影响就不会发生，因此建议在测量外泌体的精确数量时选用肝素。但是也有研究表明肝素可以导致体外条件下外泌体的减少。总之，目前尚需要更多的研究论证抗凝剂是否及如何对外泌体的释放，作用和下游反应产生特异性影响。

血清样品（有条件的话尽量采用血浆，避免血小板来源的外泌体影响）：

(1) 用采血针和普通血清管（不含任何试剂，10ml规格）采血10 ml；

(2) 室温静置 30 min，然后4°C条件下，静置3-4小时（此时可见血块析出）；

(3) 用移液器吸取上面的淡黄色血清（应该有4 ml左右）转入15 ml离心管中，4°C条件下 3000g离心15min，小心取上清转入新的15 ml离心管中，**程度保证血清质量；

(4) 离心后的血清15分钟内冻存于-80°C冰箱；

提示：送样量**4 ml以上（分离4 ml血清约需要10-15ml全血）。

   作者就在miR-19a安装了一个“监视器”，然后转染到星形胶质细胞内，再与**细胞，CAF共培养，在光镜和荧光图像下追踪到，miR-19a转移到了**细胞内，且在******显微镜下观察到了星形胶质细胞培养基有较多的外泌体（相较于CAF)。并一再证明是外泌体将miR-19a运载到**细胞：体外干扰外泌体；体内干扰外泌体；干扰外泌体后再加入外泌体。得出第三个结论：星形胶质细胞分泌的外泌体，将靶向PTEN的miR-19a转运到**细胞。 一个好的外泌体需要具备哪些特点您知道吗？四川样本制备外泌体活动

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    基于目前的研究，miRNA分拣如外泌体有四条可能的途径，虽然深层的机制还远不够清楚。一、中性鞘磷脂酶-2(nSMase2)依赖性途径。nSMase2是***个被报道与miRNA进入外泌体有关的分子。Kosakaetal.发现nSMase2的过表达能增加外泌体miRNA的数量，相反地，***nSMase2表达减少外泌体miRNA数量。二、miRNA模体和苏素化核不均一核糖**白（hnRNPs）依赖性途径。Villarroya-Beltrietal.发现苏素化的hnRNPA2B1能识别miRNA序列上的3’端部分，引起特异性的miRNA被装入外泌体。类似的是，其他两种hnRNP家族蛋白,hnRNPA1和hnRNPC,也能与外泌体miRNA结合，提示它们也可能是miRNA分拣机制中的一员。然而，结合的模体还未明确。三、miRNA序列3’末端依赖性途径。Koppers-Lalicetal.发现尿苷化的内源性miRNA的3’末端主要存在于来自B细胞或尿液的外泌体中，而腺苷化的内源性miRNA的3’末端主要存在于B细胞中。以上两种选择模式共同提示了miRNA序列3’末端含有一个关键的分拣信号。四、miRNA诱导的沉默复合体(miRISC)相关途径。 广东WB外泌体售后分析